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Echinacoside targets HSC70 to promote osteoblast differentiation via Wnt/β-catenin signaling activation and mitochondrial regulation 认领 引用
1
作者 Dong Han Shihao Chen +4 位作者 Xiaojuan Wu Xiaoli Jiang Ping Li Weilong Xu Fei Li 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2026年第6期734-744,共11页
Osteoporosis(OP)is characterized by impaired osteoblast activity and excessive bone resorption,yet effective anabolic therapies remain limited.Here,we identify heat shock cognate 71 kDa protein(HSC70)as a novel negati... Osteoporosis(OP)is characterized by impaired osteoblast activity and excessive bone resorption,yet effective anabolic therapies remain limited.Here,we identify heat shock cognate 71 kDa protein(HSC70)as a novel negative regulator of osteoblast differentiation and reveal echinacoside(ECH),a natural phenylethanoid glycoside from Cistanche deserticola,as its direct inhibitor.Functional studies demonstrated that inhibition or knockdown of Hsc70 promoted osteoblast differentiation and mineralization,while Hsc70 overexpression abrogated the effects of ECH.Mechanistically,ECH suppressed HSC70 activity to activate Wnt/β-catenin signaling,enhanceβ-catenin nuclear translocation,and improve mitochondrial dynamics,ATP production,and biogenesis,thereby providing metabolic support for osteogenesis.In vivo,ECH treatment and hsc70 knockout alleviated glucocorticoid-induced bone loss and restored mineralization in zebrafish models.Collectively,this work uncovers the HSC70–β-catenin/mitochondrial axis as a druggable pathway for skeletal homeostasis and positions ECH as a promising natural lead for developing bone-anabolic therapies against OP. 展开更多
关键词 Echinacoside HSC70 Osteoblast differentiation Mitochondria Osteoporosis
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miR-296-3p通过靶向ZBTB20抑制HSC-T6细胞的活化 认领 引用
2
作者 周静 李以恒 +5 位作者 李尹凡 崔笑妍 王梅梅 张荣花 刘志勇 章广玲 《海南医科大学学报》 CAS 北大核心 2026年第9期649-660,共12页
目的:探讨miR-296-3p通过靶向锌指和BTB结构域蛋白20(BTB domain-containing protein 20,ZBTB20)对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的调控作用。方法:采用qRT-PCR检测经过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的大... 目的:探讨miR-296-3p通过靶向锌指和BTB结构域蛋白20(BTB domain-containing protein 20,ZBTB20)对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的调控作用。方法:采用qRT-PCR检测经过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的大鼠肝星状细胞HSC-T6中纤维化标志物和miR-296-3p的表达水平;利用脂质体转染法将miR-296-3p mimic/inhibitor及各自的对照转染到HSC-T6细胞中,分组为:mimic NC组、miR-296-3p mimic组、inhibitor组和miR-296-3p inhibitor组,并且通过qRT-PCR、Western Blot、CCK-8、集落形成和Transwell实验检测转染miR-296-3p mimic/inhibitor后对HSC-T6细胞活化能力的影响;利用生物信息学方法预测miR-296-3p的候选靶基因,并用双荧光素酶基因报告实验进行验证;qRTPCR和Western blot实验检测miR-296-3p与候选靶基因ZBTB20之间的靶定关系;qRT-PCR、CCK-8及Transwell实验分析pcDNA3.1-ZBTB20能否逆转miR-296-3p+mimics对HSC-T6细胞活化能力的抑制作用。结果:HSC-T6细胞被TGF-β1刺激后进一步活化,并且活化的细胞中的miR-296-3p表达水平下调;miR-296-3p抑制HSC-T6的增殖、迁移,降低肝纤维化标志物I型胶原蛋白(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;通过生物信息学数据库预测以及双荧光素酶基因报告实验验证显示ZBTB20是miR-296-3p的功能靶基因,并且在HSC-T6中miR-296-3p负调控ZBTB20的表达;过表达ZBTB20可以部分逆转过表达miR-296-3p对HSC-T6活化的抑制作用。结论:miR-296-3p通过靶向抑制ZBTB20的表达从而抑制HSC-T6细胞的进一步活化。 展开更多
关键词 miR-296-3p ZBTB20 HSC-T6细胞 肝纤维化 增殖 迁移
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基于MEKK3对HSC-LSEC互作网络的调控探讨中药抗肝纤维化的潜在机制 认领 引用
3
作者 李怡宁 杨凯尧 +4 位作者 张梦茹 刘欢 赵杨 陈利 张峰 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2026年第8期1267-1278,共12页
肝纤维化是一类危害性极强的慢性肝脏疾病,其核心病理环节是HSC与LSEC的异常互作,而MEKK3作为MAPK通路关键上游分子,可能通过调控HSC与LSEC二者的生物学功能及细胞间互作成为肝纤维化潜在治疗靶点。目前西医缺乏抗肝纤维化特异性药物,... 肝纤维化是一类危害性极强的慢性肝脏疾病,其核心病理环节是HSC与LSEC的异常互作,而MEKK3作为MAPK通路关键上游分子,可能通过调控HSC与LSEC二者的生物学功能及细胞间互作成为肝纤维化潜在治疗靶点。目前西医缺乏抗肝纤维化特异性药物,中医药凭借多成分、多靶点的优势展现出独特治疗潜力,但其作用机制尚难明确。本文梳理肝纤维化研究现状,阐明HSC-LSEC互作在肝纤维化中的核心作用及肝脏微环境的协同影响,总结中药活性成分及经典复方可通过靶向抑制MEKK3,调控该细胞互作网络,发挥抗纤维化功效。针对现有研究局限,未来需深入解析MEKK3介导的细胞互作机制,开展中药药效验证与临床转化,为开发抗肝纤维化中药新药提供理论支撑。 展开更多
关键词 肝纤维化 HSC LSEC MEKK3 中药
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解毒方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡的影响 认领 引用
4
作者 黄国开 梁淑芳 +1 位作者 程彬彬 凌昌全 《西部中医药》 2026年第1期1-5,共5页
目的:探讨解毒方对大鼠肝星状细胞(rat hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、解毒方高剂量组及解毒方低剂量组,每组5只。解毒方高、低剂量组分别给予解毒方42、8.4 g/(kg·... 目的:探讨解毒方对大鼠肝星状细胞(rat hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、解毒方高剂量组及解毒方低剂量组,每组5只。解毒方高、低剂量组分别给予解毒方42、8.4 g/(kg·d)剂量灌胃,空白组给予等体积生理盐水,干预3天后腹主动脉取血制备含药血清,用含药血清培养活化的HSC-T6细胞,利用MTT法检测细胞增殖情况、流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡情况,并用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白[半胱天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase-3)、Caspase-7、Caspase-9、B淋巴细胞瘤(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL2-AssociatedX的蛋白质(BCL2-AssociatedX,BAX)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminalkinase,P-JNK)]表达情况。结果:低剂量解毒方含药血清对HSC-T6细胞增殖无明显抑制作用,而高剂量解毒方含药血清能够明显抑制HSC-T6细胞增殖(P<0.05);低、高剂量解毒方含药血清均能够诱导HSC-T6细胞凋亡,能够诱导Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9活化,抑制Bcl-2蛋白表达,上调BAX蛋白表达,诱导JNK磷酸化。结论:解毒方含药血清能够抑制肝星状细胞增殖和凋亡,诱导肝星状细胞凋亡的作用可能与改变Bcl-2/Bax比例、激活Caspase级联反应及JNK磷酸化有关。 展开更多
关键词 肝癌 解毒方 HSC-T6 增殖 凋亡
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HSC Chemistry在中和焓的测定实验中的应用 认领 引用
5
作者 王艳坤 王一帆 《河南财政金融学院学报（自然科学版）》 2025年第2期52-56,共5页
在介绍中和焓的测定实验基本原理和HSC Chemistry软件的基础上,对比实验数据,探讨了HSC Chemistry软件在中和焓的测定实验中的具体应用。实验结果表明,在物理化学实验过程中充分利用HSC Chemistry软件,不仅验证了化学热力学基本原理,而... 在介绍中和焓的测定实验基本原理和HSC Chemistry软件的基础上,对比实验数据,探讨了HSC Chemistry软件在中和焓的测定实验中的具体应用。实验结果表明,在物理化学实验过程中充分利用HSC Chemistry软件,不仅验证了化学热力学基本原理,而且能通过理论计算数据对实验结果进行误差分析。理论联系实际的教学方式,巩固了学生对化学热力学知识的理解与掌握,并为实验改进指明了方向。 展开更多
关键词 HSC Chemistry 物理化学实验 中和焓 化学热力学 实验误差
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肝复胶囊对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制 认领 引用
6
作者 李敏仪 黄以蓉 +5 位作者 彭凯 彭继 谢锋 杨馨怡 黄九林 李敏 《特产研究》 2025年第5期133-138,共6页
本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最... 本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最佳造模浓度,将细胞分为空白组(CON)、模型组(MOD)、肝复胶囊低剂量组(GFC-L)、肝复胶囊中剂量组(GFC-M)、肝复胶囊高剂量组(GFC-H),采用细胞增殖检测(CCK8)法检测各组细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、IL-1 、TNF-含量,蛋白免疫印记试验(Western blot)检测各细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain, ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)及-平滑肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,-SMA)的表达。结果表明,与CON组相比,GFC能抑制HSC-T6细胞的增殖能力,减少HSC分泌IL-6、IL-1 、TNF-含量,降低HSC中NLRP3、ASC、Caspase-1及-SMA的表达量。GFC可能通过调节NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路和减少-SMA蛋白表达,从而抑制HSC-T6增殖,起到抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝复胶囊 含药血清 HSC-T6细胞 NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路
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化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响 认领 引用
7
作者 郑保平 罗耀玲 +3 位作者 喻道舫 张婉晴 黄青 苏腾伟 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2025年第5期149-152,I0004,I0005,共4页
目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Anne... 目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Annexin V/PI双染法及JC-10染色法检测细胞凋亡;Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果MTT结果显示10%的总方、活血化瘀方、化痰方含药血清对HSC-T6生长有明显抑制作用(P<0.05)。Edu标记实验结果表明总方和活血化瘀方与对照组相比细胞增殖数显著减少(P<0.05)。Annexin V/PI和JC-10检测结果显示化痰方、活血化瘀方和总方含药血清可显著促进细胞凋亡(P<0.01)。Western blot结果显示活血化瘀方和总方可降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05),增加Bax蛋白表达(P<0.05)。结论化痰活血扶正方含药血清能够抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖,并通过线粒体应激来诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 化痰活血扶正方 含药血清 大鼠肝星状细胞HSC-T6 增殖 凋亡
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COX-2抑制剂尼美舒利对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响 认领 引用
8
作者 陆丽娟 彭芳 阳学风 《中南医学科学杂志》 CAS 2025年第6期977-979,1100,共3页
目的探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对肝星状细胞(HSC)-T6细胞增殖、凋亡的影响。方法将HSC-T6细胞实验分为对照组(RPMI-1640培养液)、低剂量组(尼美舒利200μmol/L培养液)和高剂量组(尼美舒利400μmol/L培养液)。采用免疫细胞化... 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对肝星状细胞(HSC)-T6细胞增殖、凋亡的影响。方法将HSC-T6细胞实验分为对照组(RPMI-1640培养液)、低剂量组(尼美舒利200μmol/L培养液)和高剂量组(尼美舒利400μmol/L培养液)。采用免疫细胞化学法检测各组COX-2蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果低剂量组、高剂量组COX-2表达水平均低于对照组(P<0.05)。在48、72 h时,HSC-T6细胞增殖能力为高剂量组<低剂量组<对照组(P<0.05)。高剂量组、低剂量组HSC-T6细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05)。结论尼美舒利对大鼠HSC-T6细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 环氧合酶-2 尼美舒利 细胞增殖 细胞凋亡 HSC-T6细胞
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川芎嗪对HSC-T6细胞Smad蛋白细胞内转位的影响 认领 引用 被引量：11
9
作者 谈博 宋健平 +4 位作者 张奉学 刘妮 李彩君 卢如玲 郭兴伯 《中药新药与临床药理》 CAS 2006年第5期320-322,共3页
目的探讨川芎嗪对HSC-T6细胞Smad蛋白细胞内转位的影响。方法在HSC-T6细胞培养皿中加入10-5mol/L川芎嗪培养2h,然后采用免疫荧光法检测HSC-T6细胞内Smad-2和Smad-4蛋白细胞内转位。结果经过川芎嗪作用2h后,未发现Smad-2和Smad-4蛋白在HS... 目的探讨川芎嗪对HSC-T6细胞Smad蛋白细胞内转位的影响。方法在HSC-T6细胞培养皿中加入10-5mol/L川芎嗪培养2h,然后采用免疫荧光法检测HSC-T6细胞内Smad-2和Smad-4蛋白细胞内转位。结果经过川芎嗪作用2h后,未发现Smad-2和Smad-4蛋白在HSC-T6细胞内出现转位。结论川芎嗪作用于细胞时可能阻断TGF-β/Smad的细胞内信号转导,这可能是其抑制HSC细胞增殖的重要机制之一。 展开更多
关键词 川芎嗪 肝纤维化 HSC Smad蛋白 转位
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柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝组织HSC、MMP-2免疫组化的影响 认领 引用 被引量：18
10
作者 王伟芹 贾爱芹 +2 位作者 杨铂 尹常健 陈雨振 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2004年第2期98-100,共3页
目的 :观察柔肝抑纤饮抗肝纤维化的疗效及优势 ,并探讨其抗肝纤维化机制。方法 :用CCl4制备大鼠实验性肝纤维化模型 ,采用免疫组化技术半定量观察各组动物肝纤维化形成过程中肝组织表达HSC、MMP 2的变化 ,并相应检测血清肝功能、脂质过... 目的 :观察柔肝抑纤饮抗肝纤维化的疗效及优势 ,并探讨其抗肝纤维化机制。方法 :用CCl4制备大鼠实验性肝纤维化模型 ,采用免疫组化技术半定量观察各组动物肝纤维化形成过程中肝组织表达HSC、MMP 2的变化 ,并相应检测血清肝功能、脂质过氧化指标等。结果 :与模型组比较 ,柔肝抑纤饮可明显抑制肝纤维化形成过程中肝组织HSC、MMP 2的表达 ,半定量统计两者均降低 ,并能使血清ALT、MDA降低 ,SOD升高 ,经统计差异具有显著性意义 (P <0 0 5、P <0 0 1)。结论 :柔肝抑纤饮具有抗脂质过氧化、降低HSC增殖活化、减少MMP 2分泌的作用 ,从而发挥了良好的抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 柔肝抑纤饮 实验性肝纤维化 肝组织 HSC MMP-2 免疫组化
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电针对帕金森病模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响 认领 引用 被引量：15
11
作者 马骏 余沛豪 +4 位作者 王述菊 王中明 王彦春 王琪 王彬 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第4期859-862,I0009,共4页
目的：观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响,探讨电针治疗帕金森病的可能作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组,每组15只... 目的：观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型大鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达的影响,探讨电针治疗帕金森病的可能作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组,每组15只。采取颈背部皮下注射鱼藤酮法制备帕金森病模型,假手术组只注射不含鱼藤酮的等量葵花油乳化液。正常组、假手术组、模型组不进行任何治疗;电针治疗组在造模完成后取穴＂风府＂、＂太冲＂,连续波,频率120次/min,每次治疗20 min,每天1次,疗程为28 d。免疫组化法检测模型大鼠黑质内TH、α-syn的阳性表达,并用Western blot法检测模型大鼠黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn的表达。结果：模型组大鼠表现出明显的PD症候群特征,电针干预后模型大鼠行为学评分明显降低（P〈0.01）;免疫组化法及Westernblot检测显示电针治疗通过上调Lamp2A、Hsc70水平能抑制错误折叠蛋白α-syn的表达,提高TH的阳性表达。结论：电针可以抑制具有细胞毒性作用的α-syn的集聚,保护多巴胺能神经元,抑制帕金森病的发展,其机制可能与干预分子伴侣介导的自噬有关。 展开更多
关键词 帕金森病 电针 分子伴侣介导的自噬 Lamp2A Hsc70 α-syn
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应用HSC法评价水稻新品种(系)丰产稳产性 认领 引用 被引量：7
12
作者 胡大明 钱益芳 +4 位作者 蒋其根 盛建 顾玉龙 顾芹芹 郑超 《上海农业学报》 北大核心 2010年第4期159-161,共3页
采用高稳系数法(HSC)结合变异系数分析了2008-2009年度上海市区域试验中11个参试品种(系)的高产稳产性,结果表明:新品种浦优608、秋优169高稳系数和产量水平排序较高,变异系数也偏高,故在良好栽培环境下增产潜力大。新品种(系)S07-55、... 采用高稳系数法(HSC)结合变异系数分析了2008-2009年度上海市区域试验中11个参试品种(系)的高产稳产性,结果表明:新品种浦优608、秋优169高稳系数和产量水平排序较高,变异系数也偏高,故在良好栽培环境下增产潜力大。新品种(系)S07-55、嘉07-34为丰产稳产型品种,地区适应性广;新品种青角574则属于低产不稳产类型,需要良好的栽培条件才可获得丰产。与几种常用统计参数间的相关分析表明,HSC法分析水稻新品种(系)高产稳产性简便有效,结合变异系数参数分析结果更加全面、准确。 展开更多
关键词 评价 HSC法 水稻品种 丰产稳产性
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大螟HSC70基因克隆及表达模式分析 认领 引用 被引量：10
13
作者 孙猛 陆明星 +1 位作者 汤小天 杜予州 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期787-797,共11页
【目的】近年来,大螟Sesamia inferens(Walker)对水稻的为害逐渐加重并成为水稻的重要害虫之一。随着全球气候变暖,大螟的分布区域也在逐渐向北延伸。HSP70家族作为分子伴侣参与生物生长发育并对外界刺激产生响应,对生物功能蛋白质的正... 【目的】近年来,大螟Sesamia inferens(Walker)对水稻的为害逐渐加重并成为水稻的重要害虫之一。随着全球气候变暖,大螟的分布区域也在逐渐向北延伸。HSP70家族作为分子伴侣参与生物生长发育并对外界刺激产生响应,对生物功能蛋白质的正确折叠及其转运有着重要意义。本研究旨在明确HSP70家族HSC70基因在大螟不同组织、不同发育阶段以及低温胁迫下的表达差异,初步探讨大螟对环境适应的分子机理。【方法】应用RT-PCR及RACE技术从大螟5龄幼虫中克隆得到HSC70基因;进行基因组验证,得到其基因组序列,分析内含子的位置及大小;应用实时定量PCR技术分析大螟HSC70基因的表达模式。【结果】大螟HSC70基因长2 160 bp,命名为Sihsc70(GenBank登录号:KJ639908),开放阅读框长1 962 bp,编码653个氨基酸,推测分子量为71.6 kDa。其氨基酸序列中含有3个HSP70家族保守序列,在C-末端存在细胞质定位信号,说明大螟HSC70是细胞质热激蛋白家族成员。大螟HSC70基因组序列长度为3 522 bp(GenBank登录号:KJ639909),含有2个内含子,长度分别为685 bp(位于编码区上游)和803 bp(位于编码区内)。在大螟5龄幼虫的不同组织中Sihsc70表达量差异不显著(P>0.05),其中在中肠、后肠和体壁中的表达量较高,在唾腺中的表达量最低;在大螟不同发育阶段中,Sihsc70的表达量在雌成虫最低,较高的3个阶段依次为卵、2龄幼虫和5龄幼虫,分别为雌成虫表达量的6.33,3.21和1.86倍;相对于对照组(27℃),低温胁迫对大螟5龄幼虫HSC70基因表达的影响差异不显著(P>0.05)。【结论】结果说明,大螟HSC70基因在不同发育阶段和幼虫不同组织中具有不同的表达水平,而低温胁迫不能诱导该基因大量表达。 展开更多
关键词 大螟 HSC70 克隆 表达模式 荧光定量PCR
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近江牡蛎HSC70基因对溶藻弧菌感染的反应 认领 引用 被引量：13
14
作者 刘志刚 张其中 +1 位作者 张占会 崔淼 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期500-508,共9页
人工注射溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis),通过实时荧光定量RT-PCR方法检测了近江牡蛎6种不同组织器官(外套膜、鳃、消化腺、闭壳肌、心脏和血细胞)中HSC70基因表达量的变化;同时采用平板活菌... 人工注射溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis),通过实时荧光定量RT-PCR方法检测了近江牡蛎6种不同组织器官(外套膜、鳃、消化腺、闭壳肌、心脏和血细胞)中HSC70基因表达量的变化;同时采用平板活菌计数法测定了近江牡蛎不同组织器官中溶藻弧菌菌量的变化。结果显示,人工注射感染溶藻弧菌后,近江牡蛎6种组织器官中HSC70基因表达量均显著性升高(P<0.05),且随时间变化均呈现出先升高后恢复至对照水平的趋势;其中鳃组织中HSC70基因分别在第6小时和第72小时出现2次显著性高表达,且在第72小时的表达量高于第6小时(P<0.05)。在多数组织器官中,HSC70基因出现显著高表达后便急剧下降至对照水平,而在消化腺中高表达持续的时间长达18 h(第6 24小时)。在注射感染溶藻弧菌后第6小时,血细胞中HSC70基因的表达量达到峰值,接近于对照水平的15倍;而在其他组织器官中,该基因表达峰值仅为对照水平的2.5倍左右。人工注射感染溶藻弧菌后3 h,3种组织(消化腺、闭壳肌和血淋巴)中均能检测到溶藻弧菌的积累,其中闭壳肌中含菌量最高,6 h时闭壳肌中含菌量急剧下降,随后又增加并维持在一定水平直至72 h;消化腺中菌量随着时间推移而增加,到达峰值后又逐步下降;血淋巴中,溶藻弧菌含量整体上随时间不断增加,到48 h稳定在较高水平。各组织中HSC70表达量与溶藻弧菌含量之间存在一定的关联性,尤其在溶藻弧菌攻击的靶器官(消化腺)中最为明显。由此可见,病原菌感染可以诱导近江牡蛎HSC70基因高表达,并且HSC70可能参与了机体抗病原菌感染的相关作用,这为进一步研究近江牡蛎HSC70基因在抗病免疫中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 近江牡蛎 HSC70基因 溶藻弧菌 基因表达 实时荧光定量PCR
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植物雌激素木黄酮对HSC-T6细胞增殖及雌激素受体表达的影响 认领 引用 被引量：4
15
作者 许君望 任晓侠 +2 位作者 王云 史红阳 王艳燕 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期192-194,198,共3页
目的研究植物雌激素木黄酮对体外培养的肝星状细胞(HSC-T6)的增殖、活化、胶原合成以及对雌激素受体(ER)表达的影响,探讨木黄酮抑制肝纤维化的作用机制。方法选择细胞系HSC-T6为体外细胞模型,随机分为4组,分别加入不同浓度的木黄酮(0.5... 目的研究植物雌激素木黄酮对体外培养的肝星状细胞(HSC-T6)的增殖、活化、胶原合成以及对雌激素受体(ER)表达的影响,探讨木黄酮抑制肝纤维化的作用机制。方法选择细胞系HSC-T6为体外细胞模型,随机分为4组,分别加入不同浓度的木黄酮(0.5、5、50μmol/L),同时设未加任何药物的空白对照组。作用24 h后采用MTT法检测HSC-T6细胞的增殖情况,放射免疫法测定细胞上清液Ⅲ型胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)的含量;免疫组化法观察木黄酮对各组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)及ER表达的影响。结果木黄酮各剂量组均不同程度地抑制HSC-T6细胞的增殖,降低其-αSMA的表达,减少PCⅢ及HA的分泌,且其抑制作用呈剂量依赖性;给予木黄酮后,HSC-T6细胞的ER表达增强,也呈剂量-效应关系。结论木黄酮可抑制体外培养的HSC-T6细胞的活化与增殖,减少细胞外基质的产生,抑制肝纤维化的形成。其作用机制可能与木黄酮增加HSC的ER表达有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞(HSC) 木黄酮 雌激素受体(ER)
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黄颡鱼HSC70基因及其组织表达分析 认领 引用 被引量：15
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作者 张娟 张其中 +1 位作者 张占会 崔淼 《水生生物学报》 CAS 北大核心 2009年第3期426-434,共9页
热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3... 热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3′非编码区225bp,开放阅读框(ORF)1938bp,编码645个氨基酸组成的蛋白质。黄颡鱼HSC70基因含有8个内含子,与人、鼠、虹鳟和花斑溪鳉的HSC70基因内含子数目相同,位置相似。其中,最长内含子(873bp)位于5′端非编码区,其余内含子(长度在80—251bp之间不等)均在编码区以内。黄颡鱼HSC70基因编码的氨基酸序列与南方鲶的相似度最高,达96.13%,与欧洲银鲫和团头鲂的相似度分别为94.45%和94.14%。RT-PCR检测显示,正常情况下黄颡鱼HSC70在血细胞、心脏、肝、头肾、脾、鳃、肌肉和脑中均有表达,但表达量在鳃中最高,肌肉中最低;统计结果显示,热激后HSC70在血细胞、肝、头肾和脑中的表达量显著上升(p0.05)。 展开更多
关键词 HSC70基因 克隆 组织表达 黄颡鱼
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基于组效关系的壮药岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性成分辨识研究 认领 引用 被引量：15
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作者 陆世银 郑华 +9 位作者 程邦 吴方 吴金霞 刘旭文 唐超玲 梁永红 张洪也 阮俊翔 宋慧 苏志恒 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1354-1361,共8页
目的建立岩黄连提取物的化学成分与其抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)作用的组效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法采用正交设计法提取得到9个岩黄连提取物,通过HPLC法对岩黄连提取物进行成分表征,以共有峰的相对峰面积来表征其... 目的建立岩黄连提取物的化学成分与其抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)作用的组效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法采用正交设计法提取得到9个岩黄连提取物,通过HPLC法对岩黄连提取物进行成分表征,以共有峰的相对峰面积来表征其相对质量分数;MTT法测定岩黄连提取物抑制HSC-T6细胞增殖活性,以抑制率为评价指标;利用SIMCA-P11.5软件的正交投影偏最小二乘法(OPLS)分析,研究共有峰与药效的相关性,根据S-载荷图与变异权重参数(VIP)值辨识显著活性成分;通过MTT法及流式细胞仪验证所筛选成分的活性。采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察所筛选成分对人正常肝细胞(HL-7702)LDH活性的影响。结果 HPLC法对9个岩黄连提取物进行表征分析结果确定了21个共有峰,其中19、18、13、20、14和16号共有峰(VIP>1)与岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性显著相关,并鉴定18、19和20号共有峰代表的化合物分别为脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱。MTT结果显示不同质量浓度脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用;流式细胞术检测结果也与MTT结果一致,脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱(0.10 mg/m L)处理HSC-T6细胞后的凋亡率分别为42.12%、42.22%、36.73%,明显高于对照组的1.69%(P<0.01)。细胞毒性实验发现当脱氢卡维丁终质量浓度低于0.15 mg/m L,巴马汀与小檗碱终质量浓度低于0.10 mg/m L时,对HL-7702细胞不具有明显的细胞毒作用。结论通过组效关系研究首次发现岩黄连提取物中脱氢卡维丁、巴马汀与小檗碱在体外能显著抑制HSC-T6细胞增殖并诱导其凋亡,且在有效质量浓度下不具有明显的细胞毒作用,表明这3种化学成分极有可能是岩黄连抗肝纤维化作用的潜在活性成分且在应用中具备一定的安全性;同时也提示基于组效关系的研究思路可为天然植物药活性成分的辨识提供行之有效的方法。 展开更多
关键词 岩黄连 组效关系 大鼠肝星状细胞(HSC-T6) 抗纤维化 脱氢卡维丁 巴马汀 小檗碱
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大口黑鲈HSC70-1基因多态性及其双倍型与生长性状的关联分析 认领 引用 被引量：6
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作者 李胜杰 樊佳佳 +4 位作者 姜鹏 白俊杰 孙建国 吴建开 费志平 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期74-80,共7页
为了探讨HSC70-1基因对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长性状的影响作用,开发与生长性状相关的分子标记,该研究采用PCR技术扩增得到HSC70-1基因的cDNA和DNA全序列,编码区cDNA序列长1 953 bp,编码650个氨基酸,其DNA全序列长3 390 bp... 为了探讨HSC70-1基因对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长性状的影响作用,开发与生长性状相关的分子标记,该研究采用PCR技术扩增得到HSC70-1基因的cDNA和DNA全序列,编码区cDNA序列长1 953 bp,编码650个氨基酸,其DNA全序列长3 390 bp,包含8个外显子和7个内含子。采用直接测序法在该基因上筛选到4个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别位于核苷酸序列中的第821、第1 105、第1 200和第2 804碱基处,且处于内含子上。SNP标记与性状的关联分析结果表明,C-821G位点上CC基因型个体的体质量和全长均显著高于CG和GG基因型(P0.05)。通过合并基因型发现,双倍型D1 (CC--CCTT)的各个生长性状表现最优,在体高和全长上显著高于D5。C-821G、A-2804T和D1与生长性状显著相关,可作为大口黑鲈分子标记辅助育种的候选标记。 展开更多
关键词 大口黑鲈 HSC70-1 关联分析 单核苷酸多态性 生长性状
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三甲益肝颗粒含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的影响 认领 引用 被引量：3
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作者 杨道坤 梁海军 +2 位作者 申保生 孙屹峰 乔汉臣 《第三军医大学学报》 北大核心 2010年第5期486-489,共4页
目的观察三甲益肝颗粒(San Jia Yi Gan granula,SJG)含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的作用,探讨SJG抗肝纤维化的细胞学基础。方法雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为5组,每组6只,分别为生理盐水对照组(Control)、水飞蓟宾组(Sily... 目的观察三甲益肝颗粒(San Jia Yi Gan granula,SJG)含药血清对HSC-T6细胞形态、增殖和凋亡的作用,探讨SJG抗肝纤维化的细胞学基础。方法雄性SD大鼠30只按随机数字表法分为5组,每组6只,分别为生理盐水对照组(Control)、水飞蓟宾组(Sily)、低剂量SJG组(SJG-L)、中剂量SJG组(SJG-M)和高剂量SJG组(SJG-H)。SJG按低、中、高(1.7、3.4、6.8g/kg)3个剂量灌胃大鼠制备含药血清,并用不同体积分数(5%、10%、20%、40%)SJG含药血清干预HSC-T6细胞株,用倒置相差显微镜观察HSC-T6细胞形态学的变化,MTT法检测SJG药物血清对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测SJG药物血清诱导HSC-T6细胞早期凋亡。结果含药血清干预后,细胞形态发生明显改变:药物组细胞较对照组细胞明显减少,细胞间隙较宽,细胞皱缩,核染色质浓集呈球形。MTT实验结果显示各组药物血清均可抑制HSC-T6细胞的增殖,SJG-M、SJG-H组对HSC-T6细胞增殖的抑制均显著高于Sily组(P0.05)。SJG-M、SJG-H组凋亡率分别为(7.09±1.04)%、(11.63±1.53)%,显著高于Sily组[(4.38±1.07)%]、SJG-L组[(4.17±0.30)%]和对照组[(1.74±0.11)%]。与对照组比较,各药物血清干预组细胞凋亡数明显增加,以SJG-H组增加最为明显。结论SJG含药血清可显著抑制HSC-T6细胞的活化、增殖,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 三甲益肝颗粒 HSC—T6细胞 细胞增殖 凋亡 肝硬化 大鼠
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大尺寸RPC管-HSC组合柱轴压性能试验研究 认领 引用 被引量：4
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作者 单波 赖大德 刘福财 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第23期96-102,共7页
在活性粉末混凝土(RPC)预制管内部浇筑高强混凝土,形成RPC管-高强混凝土(HSC)组合柱,扩展了RPC管-混凝土组合柱(CFRT)这一新型组合结构的范围。开展了RPC管离心法成型的配合比与工艺研究,成功试制了RPC管。对4组大尺寸CFRT和1组箍筋约... 在活性粉末混凝土(RPC)预制管内部浇筑高强混凝土,形成RPC管-高强混凝土(HSC)组合柱,扩展了RPC管-混凝土组合柱(CFRT)这一新型组合结构的范围。开展了RPC管离心法成型的配合比与工艺研究,成功试制了RPC管。对4组大尺寸CFRT和1组箍筋约束高强混凝土柱试件进行轴压试验,试验参数为内部混凝土和纵筋配置率。结果表明:内部填充HSC的CFRT柱在整个受力过程中,预制管身基本完整,抗压性能显著优于用于对比的箍筋约束高强混凝土柱;CFRT柱的抗压强度随内部混凝土强度的提高而提高,但约束效应逐步降低,对CFRT柱的内部混凝土的强度应该有所限制;在内部混凝土中配置纵向钢筋,对CFRT的延性影响不大;基于Mander(1988)约束模型,提出了内部填充高强混凝土的CFRT柱轴向承载力计算方法,模型的预测结果与试验结果吻合较好。 展开更多
关键词 活性粉末混凝土(RPC) 高强混凝土(HSC) 约束 组合柱 轴压性能
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