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miR-296-3p通过靶向ZBTB20抑制HSC-T6细胞的活化 认领 引用
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作者 周静 李以恒 +5 位作者 李尹凡 崔笑妍 王梅梅 张荣花 刘志勇 章广玲 《海南医科大学学报》 CAS 北大核心 2026年第9期649-660,共12页
目的:探讨miR-296-3p通过靶向锌指和BTB结构域蛋白20(BTB domain-containing protein 20,ZBTB20)对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的调控作用。方法:采用qRT-PCR检测经过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的大... 目的:探讨miR-296-3p通过靶向锌指和BTB结构域蛋白20(BTB domain-containing protein 20,ZBTB20)对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的调控作用。方法:采用qRT-PCR检测经过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的大鼠肝星状细胞HSC-T6中纤维化标志物和miR-296-3p的表达水平;利用脂质体转染法将miR-296-3p mimic/inhibitor及各自的对照转染到HSC-T6细胞中,分组为:mimic NC组、miR-296-3p mimic组、inhibitor组和miR-296-3p inhibitor组,并且通过qRT-PCR、Western Blot、CCK-8、集落形成和Transwell实验检测转染miR-296-3p mimic/inhibitor后对HSC-T6细胞活化能力的影响;利用生物信息学方法预测miR-296-3p的候选靶基因,并用双荧光素酶基因报告实验进行验证;qRTPCR和Western blot实验检测miR-296-3p与候选靶基因ZBTB20之间的靶定关系;qRT-PCR、CCK-8及Transwell实验分析pcDNA3.1-ZBTB20能否逆转miR-296-3p+mimics对HSC-T6细胞活化能力的抑制作用。结果:HSC-T6细胞被TGF-β1刺激后进一步活化,并且活化的细胞中的miR-296-3p表达水平下调;miR-296-3p抑制HSC-T6的增殖、迁移,降低肝纤维化标志物I型胶原蛋白(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;通过生物信息学数据库预测以及双荧光素酶基因报告实验验证显示ZBTB20是miR-296-3p的功能靶基因,并且在HSC-T6中miR-296-3p负调控ZBTB20的表达;过表达ZBTB20可以部分逆转过表达miR-296-3p对HSC-T6活化的抑制作用。结论:miR-296-3p通过靶向抑制ZBTB20的表达从而抑制HSC-T6细胞的进一步活化。 展开更多
关键词 miR-296-3p ZBTB20 HSC-T6细胞 肝纤维化 增殖 迁移
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解毒方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡的影响 认领 引用
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作者 黄国开 梁淑芳 +1 位作者 程彬彬 凌昌全 《西部中医药》 2026年第1期1-5,共5页
目的:探讨解毒方对大鼠肝星状细胞(rat hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、解毒方高剂量组及解毒方低剂量组,每组5只。解毒方高、低剂量组分别给予解毒方42、8.4 g/(kg·... 目的:探讨解毒方对大鼠肝星状细胞(rat hepatic stellate cells,HSCs)HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白组、解毒方高剂量组及解毒方低剂量组,每组5只。解毒方高、低剂量组分别给予解毒方42、8.4 g/(kg·d)剂量灌胃,空白组给予等体积生理盐水,干预3天后腹主动脉取血制备含药血清,用含药血清培养活化的HSC-T6细胞,利用MTT法检测细胞增殖情况、流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡情况,并用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白[半胱天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase-3)、Caspase-7、Caspase-9、B淋巴细胞瘤(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL2-AssociatedX的蛋白质(BCL2-AssociatedX,BAX)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminalkinase,P-JNK)]表达情况。结果:低剂量解毒方含药血清对HSC-T6细胞增殖无明显抑制作用,而高剂量解毒方含药血清能够明显抑制HSC-T6细胞增殖(P<0.05);低、高剂量解毒方含药血清均能够诱导HSC-T6细胞凋亡,能够诱导Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9活化,抑制Bcl-2蛋白表达,上调BAX蛋白表达,诱导JNK磷酸化。结论:解毒方含药血清能够抑制肝星状细胞增殖和凋亡,诱导肝星状细胞凋亡的作用可能与改变Bcl-2/Bax比例、激活Caspase级联反应及JNK磷酸化有关。 展开更多
关键词 肝癌 解毒方 HSC-T6 增殖 凋亡
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肝复胶囊对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制 认领 引用
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作者 李敏仪 黄以蓉 +5 位作者 彭凯 彭继 谢锋 杨馨怡 黄九林 李敏 《特产研究》 2025年第5期133-138,共6页
本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最... 本研究旨在探讨肝复胶囊(Gan Fu capsule, GFC)对TGF-1诱导HSC-T6细胞增殖的影响及作用机制。试验采用制备空白血清和GFC含药血清,体外培养HSC-T6细胞24 h后,CCK8法筛选最佳给药血清浓度,采用不同浓度TGF-1诱导HSC-T6细胞,CCK8法筛选最佳造模浓度,将细胞分为空白组(CON)、模型组(MOD)、肝复胶囊低剂量组(GFC-L)、肝复胶囊中剂量组(GFC-M)、肝复胶囊高剂量组(GFC-H),采用细胞增殖检测(CCK8)法检测各组细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、IL-1 、TNF-含量,蛋白免疫印记试验(Western blot)检测各细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis associated speck-like protein containing a caspase activating recruitment domain, ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)及-平滑肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,-SMA)的表达。结果表明,与CON组相比,GFC能抑制HSC-T6细胞的增殖能力,减少HSC分泌IL-6、IL-1 、TNF-含量,降低HSC中NLRP3、ASC、Caspase-1及-SMA的表达量。GFC可能通过调节NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路和减少-SMA蛋白表达,从而抑制HSC-T6增殖,起到抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝复胶囊 含药血清 HSC-T6细胞 NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路
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化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响 认领 引用
4
作者 郑保平 罗耀玲 +3 位作者 喻道舫 张婉晴 黄青 苏腾伟 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2025年第5期149-152,I0004,I0005,共4页
目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Anne... 目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活力,Edu标记法检测细胞增殖能力,Annexin V/PI双染法及JC-10染色法检测细胞凋亡;Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果MTT结果显示10%的总方、活血化瘀方、化痰方含药血清对HSC-T6生长有明显抑制作用(P<0.05)。Edu标记实验结果表明总方和活血化瘀方与对照组相比细胞增殖数显著减少(P<0.05)。Annexin V/PI和JC-10检测结果显示化痰方、活血化瘀方和总方含药血清可显著促进细胞凋亡(P<0.01)。Western blot结果显示活血化瘀方和总方可降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05),增加Bax蛋白表达(P<0.05)。结论化痰活血扶正方含药血清能够抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖,并通过线粒体应激来诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 化痰活血扶正方 含药血清 大鼠肝星状细胞HSC-T6 增殖 凋亡
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COX-2抑制剂尼美舒利对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响 认领 引用
5
作者 陆丽娟 彭芳 阳学风 《中南医学科学杂志》 CAS 2025年第6期977-979,1100,共3页
目的探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对肝星状细胞(HSC)-T6细胞增殖、凋亡的影响。方法将HSC-T6细胞实验分为对照组(RPMI-1640培养液)、低剂量组(尼美舒利200μmol/L培养液)和高剂量组(尼美舒利400μmol/L培养液)。采用免疫细胞化... 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利对肝星状细胞(HSC)-T6细胞增殖、凋亡的影响。方法将HSC-T6细胞实验分为对照组(RPMI-1640培养液)、低剂量组(尼美舒利200μmol/L培养液)和高剂量组(尼美舒利400μmol/L培养液)。采用免疫细胞化学法检测各组COX-2蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果低剂量组、高剂量组COX-2表达水平均低于对照组(P<0.05)。在48、72 h时,HSC-T6细胞增殖能力为高剂量组<低剂量组<对照组(P<0.05)。高剂量组、低剂量组HSC-T6细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05)。结论尼美舒利对大鼠HSC-T6细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 环氧合酶-2 尼美舒利 细胞增殖 细胞凋亡 HSC-T6细胞
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基于组效关系的壮药岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性成分辨识研究 认领 引用 被引量:15
6
作者 陆世银 郑华 +9 位作者 程邦 吴方 吴金霞 刘旭文 唐超玲 梁永红 张洪也 阮俊翔 宋慧 苏志恒 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1354-1361,共8页
目的建立岩黄连提取物的化学成分与其抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)作用的组效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法采用正交设计法提取得到9个岩黄连提取物,通过HPLC法对岩黄连提取物进行成分表征,以共有峰的相对峰面积来表征其... 目的建立岩黄连提取物的化学成分与其抑制大鼠肝星状细胞(HSC-T6)作用的组效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法采用正交设计法提取得到9个岩黄连提取物,通过HPLC法对岩黄连提取物进行成分表征,以共有峰的相对峰面积来表征其相对质量分数;MTT法测定岩黄连提取物抑制HSC-T6细胞增殖活性,以抑制率为评价指标;利用SIMCA-P11.5软件的正交投影偏最小二乘法(OPLS)分析,研究共有峰与药效的相关性,根据S-载荷图与变异权重参数(VIP)值辨识显著活性成分;通过MTT法及流式细胞仪验证所筛选成分的活性。采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察所筛选成分对人正常肝细胞(HL-7702)LDH活性的影响。结果 HPLC法对9个岩黄连提取物进行表征分析结果确定了21个共有峰,其中19、18、13、20、14和16号共有峰(VIP>1)与岩黄连抑制HSC-T6细胞增殖活性显著相关,并鉴定18、19和20号共有峰代表的化合物分别为脱氢卡维丁、巴马汀和小檗碱。MTT结果显示不同质量浓度脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱对HSC-T6细胞增殖具有明显抑制作用;流式细胞术检测结果也与MTT结果一致,脱氢卡维丁、巴马汀及小檗碱(0.10 mg/m L)处理HSC-T6细胞后的凋亡率分别为42.12%、42.22%、36.73%,明显高于对照组的1.69%(P<0.01)。细胞毒性实验发现当脱氢卡维丁终质量浓度低于0.15 mg/m L,巴马汀与小檗碱终质量浓度低于0.10 mg/m L时,对HL-7702细胞不具有明显的细胞毒作用。结论通过组效关系研究首次发现岩黄连提取物中脱氢卡维丁、巴马汀与小檗碱在体外能显著抑制HSC-T6细胞增殖并诱导其凋亡,且在有效质量浓度下不具有明显的细胞毒作用,表明这3种化学成分极有可能是岩黄连抗肝纤维化作用的潜在活性成分且在应用中具备一定的安全性;同时也提示基于组效关系的研究思路可为天然植物药活性成分的辨识提供行之有效的方法。 展开更多
关键词 岩黄连 组效关系 大鼠肝星状细胞(HSC-T6) 抗纤维化 脱氢卡维丁 巴马汀 小檗碱
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罗汉果甜苷对肝星状细胞HSC-T6增殖及肝纤维化相关基因的影响 认领 引用 被引量:12
7
作者 王勤 王巍 +5 位作者 龙颖 夏星 覃洪含 唐慧勤 王志萍 潘为高 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期331-334,共4页
目的研究罗汉果甜苷含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6的毒性以及对细胞增殖与相关基因表达的影响,初步探讨其抗肝纤维化作用机制。方法以罗汉果甜苷含药血清干预HSC-T6,乳酸脱氢酶(LDH)法检测罗汉果甜苷含药血清对HSC-T6的细胞毒性;MTT... 目的研究罗汉果甜苷含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6的毒性以及对细胞增殖与相关基因表达的影响,初步探讨其抗肝纤维化作用机制。方法以罗汉果甜苷含药血清干预HSC-T6,乳酸脱氢酶(LDH)法检测罗汉果甜苷含药血清对HSC-T6的细胞毒性;MTT法检测其对HSC-T6生长的抑制作用;RT-PCR法检测HSC-T6中I型胶原(Col-I)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA表达。结果罗汉果甜苷含药血清对HSC-T6无特异毒性,罗汉果甜苷含药血清体积分数为20%、10%时可显著抑制HSC-T6的增殖(P<0.05、0.01),并对Col-I、TGF-β1及TIMP-1mRNA表达均表现显著抑制作用(P<0.05、0.01)。结论罗汉果甜苷含药血清对HSC-T6细胞无特异毒性,对HSC-T6细胞增殖、Col-I有抑制作用,促进细胞外基质(ECM)降解,这可能是其抗肝纤维化的部分作用机制。 展开更多
关键词 罗汉果甜苷 肝纤维化 HSC-T6 细胞增殖 细胞外基质 含药血清
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复方861对HSC-T6细胞基质分解素1mRNA表达水平影响的研究 认领 引用 被引量:14
8
作者 阴赪宏 马红 +3 位作者 王爱民 马雪梅 贾继东 王宝恩 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期168-170,共3页
为观察复方 86 1对HSC -T6细胞基质分解素 1(MMP3 )mRNA表达水平的影响 ,复方 86 1以 0 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等浓度作用于HSC -T6细胞 48小时 ,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平的影响。结果表明 ,复... 为观察复方 86 1对HSC -T6细胞基质分解素 1(MMP3 )mRNA表达水平的影响 ,复方 86 1以 0 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等浓度作用于HSC -T6细胞 48小时 ,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平的影响。结果表明 ,复方 86 10 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等不同浓度的HSC -T6细胞mRNA表达水平依次为 2 75± 0 35、3 0 0± 0 0 1、3 5 0± 0 71,与空白对照组比较 ,可明显提高MMP3 mRNA表达水平 (P <0 0 5或P <0 0 1)。因此 ,复方 86 1提高HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平 ,可能是其促进胶原降解 ,抗肝纤维化的作用机理之一。 展开更多
关键词 表达水平 基质分解素 复方861 HSC-T6细胞 MMP3 mRNA 逆转录PCR 肝纤维化
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苦参素对肝星状细胞HSC-T6增殖及端粒酶的影响 认领 引用 被引量:5
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作者 周于禄 刘小云 +1 位作者 刘世坤 袁洪 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2051-2055,共5页
目的探讨苦参素在诱导肝星状细胞HSC-T6凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶(rTERT)mRNA表达的影响。方法将不同质量浓度的苦参素与HSC-T6细胞共培养不同时间后,MTT法检测苦参素对HSC-T6细胞的生长抑制作用;流式细... 目的探讨苦参素在诱导肝星状细胞HSC-T6凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶(rTERT)mRNA表达的影响。方法将不同质量浓度的苦参素与HSC-T6细胞共培养不同时间后,MTT法检测苦参素对HSC-T6细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测苦参素对HSC-T6细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测苦参素作用后HSC-T6细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测苦参素对HSC-T6细胞rTERT mRNA表达的影响。结果苦参素能显著抑制HSC-T6细胞生长、诱导细胞凋亡、降低端粒酶活性,并抑制rTERT mRNA表达。结论苦参素对HSC-T6细胞增殖具有抑制作用,可能与抑制细胞端粒酶及其亚单位rTERT的活性有关。 展开更多
关键词 苦参素 肝星状细胞 HSC-T6 细胞凋亡 端粒酶 端粒酶逆转录酶
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化肝煎对HSC-T6细胞TGF-β1、CTGF及MAPK1表达的影响 认领 引用 被引量:7
10
作者 高元峰 肖望重 +2 位作者 肖岚 李珊 唐锋 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第7期185-188,共4页
目的探讨化肝煎含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖与相关基因表达的影响。方法采用正交试验法优选化肝煎含药血清的制备,并以优化后的化肝煎含药血清干预HSC-T6,MTS法检测其对HSC-T6生长的抑制作用;qPCR法检测HSC-T6细胞中转化生长因... 目的探讨化肝煎含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖与相关基因表达的影响。方法采用正交试验法优选化肝煎含药血清的制备,并以优化后的化肝煎含药血清干预HSC-T6,MTS法检测其对HSC-T6生长的抑制作用;qPCR法检测HSC-T6细胞中转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、有丝分裂原活化蛋白激酶1(mitogen activated protein kinase,MAPK1)mRNA表达。结果A1B2C2为优化方案,即给正常大鼠灌胃给药,末次给药后1 h,采集血清;化肝煎含药血清体积分数为10%、20%和40%时可显著抑制HSC-T6的增殖(P<0.01、0.001),并对TGF-β1、CTGF及MAPK1 mRNA表达均表现显著抑制作用(P<0.01、0.001)。结论化肝煎含药血清能抑制HSC-T6的增殖,可能跟抑制TGF-β1、CTGF及MAPK1有关。 展开更多
关键词 化肝煎 HSC-T6 TGF-β1 CTGF MAPK1
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TGF-β1对大鼠HSC-T6细胞增殖、细胞周期和胶原分泌的影响 认领 引用 被引量:15
11
作者 郑素军 邢欣悦 +7 位作者 韩源平 武聚山 王世美 张莹 刘梅 陈煜 刘霜 段钟平 《实用肝脏病杂志》 CAS 2012年第4期327-331,共5页
目的观察TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖、细胞周期以及分泌肝纤维化相关胶原的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期;采用荧光定量RT-PCR法检测SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、... 目的观察TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖、细胞周期以及分泌肝纤维化相关胶原的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期;采用荧光定量RT-PCR法检测SMAD3、c-myc、cdk-2、cyclinE、EGF、HGF、Bcl-2、NF-κB、MMP1、MMP9、MMP14、TIMP-1、PAI-1、α-SMA、COLⅠ及COLⅢ等基因mRNA水平;采用ELISA法检测细胞培养液COLⅠ、COLⅢ和α-SMA含量。结果与对照组比,TGF-β1处理24h及36h时,细胞形态及生长状况均无明显变化;在24h和36h时,TGF-β1处理组细胞G0/G1期细胞比率均减少(24h:57.3±8.5%vs 60.6±9.7%;36h:53.0±2.2%vs 56.6±5.0%),S期细胞比例略高(24h:30.6±7.2%vs26.4±10.1%;36h:35.2±3.7%vs 30.8±2.5%),但差异无统计学意义(P>0.05);TGF-β1处理组SMAD3、c-myc、cdk2、cyclin E、EGF、Bcl-2、NF-κB、TIMP1、PAI-1、α-SMA及COLⅠmRNA在24h和36h表达均上调,HGF、MMP1、MMP9、MMP14及COLⅢmRNA在24h时表达下调,36h时表达上调;TGF-β1处理组HSC-T6细胞分泌COLⅠ[24h:(63.0±7.4ng/ml vs 33.2±10.8 ng/ml,P<0.05;36h:58.5±6.0ng/ml vs 42.2±6.3ng/ml,P<0.05];α-SMA[24h:20.6±2.6ng/ml vs 4.2±0.7ng/ml,P<0.05;36h:59.7±14.6ng/ml vs 36.8±5.6ng/ml,P<0.05)均显著增加。结论 TGF-β1对大鼠肝星状细胞系HSC-T6显示了促增殖作用,并能促进肝纤维化相关胶原的分泌。 展开更多
关键词 HSC-T6 TGF-β1 SMAD3 增殖 细胞周期
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柴胡皂苷d对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体机制 认领 引用 被引量:7
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作者 沈艳婷 刘进锴 +3 位作者 阙任烨 陶智会 林柳兵 李勇 《江苏中医药》 CAS 2015年第12期81-84,共4页
目的:研究柴胡皂苷d(SSd)对氧化应激诱导的肝星状细胞HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体(ER)机制,探讨植物雌激素对肝纤维化的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,采... 目的:研究柴胡皂苷d(SSd)对氧化应激诱导的肝星状细胞HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体(ER)机制,探讨植物雌激素对肝纤维化的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,采用免疫组化法,检测SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内α-SMA蛋白表达的影响;采用Western blot法,观察SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响。结果:氧化应激处理HSC-T6细胞后,α-SMA、AP-1和P65/NF-κB表达明显增加。如使用雌二醇(E2)或SSd预处理HSC-T6细胞24h后再接受氧化应激处理,三种蛋白表达明显降低,这种作用可被雌激素受体(ER)完全拮抗剂ICI-182780和ERβ拮抗剂THC抑制。结论 :E2、SSd可能通过调控ERβ,进而抑制核转录因子AP-1和P65/NF-κB的表达起到抑制HSC-T6活化的作用。 展开更多
关键词 柴胡皂苷d 星状细胞 HSC-T6细胞 体外实验 大鼠
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当归芍药散含药血清对ET-1诱导的HSC-T6细胞收缩的影响 认领 引用 被引量:4
13
作者 李国强 潘永福 +5 位作者 方庆 周敏 刘浩坤 姚瑶 王运来 许钒 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第4期361-365,共5页
目的:通过体外实验研究当归芍药散含药血清对ET-1诱导的肝星状细胞(HSC-T6细胞)收缩的作用。方法:采用FITC-鬼笔环肽细胞骨架染色方法观察HSC-T6细胞肌动蛋白丝变化的数量;采用I型鼠尾胶原法观察HSC-T6细胞收缩的影响。结果:当归芍药散... 目的:通过体外实验研究当归芍药散含药血清对ET-1诱导的肝星状细胞(HSC-T6细胞)收缩的作用。方法:采用FITC-鬼笔环肽细胞骨架染色方法观察HSC-T6细胞肌动蛋白丝变化的数量;采用I型鼠尾胶原法观察HSC-T6细胞收缩的影响。结果:当归芍药散含药血清各剂量组能有效抑制肌动蛋白丝数量增多;在第24 h,模型组(ET-1)的胶原凝胶面积明显缩小(P<0.01);当归芍药散含药血清各剂量组可以不同程度地抑制ET-1(10 nmol/L)引起的HSC-T6细胞胶原凝胶收缩(P<0.05)。结论:当归芍药散含药血清可以抑制ET-1诱导的HSCs收缩。 展开更多
关键词 当归芍药散 含药血清 HSC-T6细胞 抑制收缩
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阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响 认领 引用 被引量:13
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作者 刘涛 胡晋红 +1 位作者 蔡溱 石晶 《第二军医大学学报》 北大核心 2000年第5期423-425,共3页
目的 :研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖及胶原合成的影响。 方法 :采用肝贮脂细胞株 ,以细胞增殖抑制率为指标 ,用噻唑蓝 (MTT)法测定药物对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖的影响 ;通过 3H-脯氨酸掺入法测定药物对 HSC- T6胶原... 目的 :研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖及胶原合成的影响。 方法 :采用肝贮脂细胞株 ,以细胞增殖抑制率为指标 ,用噻唑蓝 (MTT)法测定药物对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖的影响 ;通过 3H-脯氨酸掺入法测定药物对 HSC- T6胶原合成的影响。 结果 :阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株 HSC- T6增殖及胶原合成的抑制率随药物浓度增加(2 8.9~ 46 2 .6 nm ol/ L)而升高 ,呈药物浓度依赖关系。 结论 :阿魏酸钠在体外对大鼠贮脂细胞株 HSC- 展开更多
关键词 阿魏酸钠 肝纤维化 贮脂细胞 HSC-T6 胶原
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基于AQP8和线粒体细胞凋亡途径相关性探讨马兰草乙醇提取物对活化的大鼠肝星细胞HSC-T6体外增殖和凋亡的影响 认领 引用 被引量:3
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作者 李嘉 高玲 +3 位作者 陈晓兰 罗乐 田源红 张雄 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第4期145-150,I0054,共6页
目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺... 目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺激24 h后,用不同浓度的马兰草乙醇提取物体外干预12、24、36、48 h,用MTT法检测马兰草乙醇提取物对活化HSC-T6存活率的影响,流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡和细胞线粒体膜电位的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测AQP8mRNA的表达水平,Western Blot检测AQP8、Cty-C的蛋白表达。结果阴性对照组相比,各组OD值和细胞存活率均有下降,基质对照组的凋亡率下降(P<0.05),其余各组的凋亡率均有所上升(P<0.05),基质对照组和马兰提取物组(20、40μg/mL)的AQP8mRNA的表达水平明显上升(P<0.05);与基质组相比,大黄素各剂量组和马兰乙醇提取物各剂量组的细胞存活率均呈时间/剂量依赖性下降,大黄素组的早期凋亡有所上升(P<0.05),马兰提取物各剂量组各时期的凋亡增加的同时呈剂量依赖性升高(P<0.05),且线粒体细胞膜电位呈剂量依赖性显著下降(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,Cty-C和AQP8的表达趋势一致,大黄素组的表达较较阴性对照组和基质对照组均有明显增多(P<0.05),马兰提取物组(40μg/mL)的表达量最多(P<0.05)。结论马兰草乙醇提取物在体外可抑制活化的HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与激活线粒体细胞凋亡途径和上调AQP8表达有关。 展开更多
关键词 马兰草乙醇提取物 HSC-T6大鼠肝星形细胞 细胞凋亡 AQP8 线粒体途径
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积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达 认领 引用 被引量:15
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作者 汤丽霞 杨光 谭家驹 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第13期1178-1180,共3页
目的:研究外源性TGF-β对肝星状细胞系(HSC-T6)的激活作用,以及积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的药理作用.方法:用LDH和MTT实验测定积雪草酸对HSC-T6细胞的细胞毒性和细胞增殖的影响.检测HSC-T6细胞受不同剂量和不同时间TGF-... 目的:研究外源性TGF-β对肝星状细胞系(HSC-T6)的激活作用,以及积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的药理作用.方法:用LDH和MTT实验测定积雪草酸对HSC-T6细胞的细胞毒性和细胞增殖的影响.检测HSC-T6细胞受不同剂量和不同时间TGF-β刺激后表达Ⅰ型胶原蛋白的最佳剂量和时间.以不同剂量的积雪草酸作用于TGF-β活化的HSC-T6细胞,提取细胞总蛋白,以Western Blot方法检测积雪草酸对TGF-β活化的HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.结果:TGF-β刺激HSC-T6细胞表达Ⅰ型胶原蛋白的最佳剂量为1ng/mL,最佳时间24h.10~30μmol/L积雪草酸可以抑制TGF-β诱导的HSC细胞Ⅰ型胶原蛋白表达.结论:外源性TGF-β可激活HSC-T6细胞表达Ⅰ型胶原蛋白;积雪草酸抑制HSC-T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达. 展开更多
关键词 积雪草酸 Ⅰ型胶原蛋白 HSC-T6细胞 转化生长因子-β
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大黄素甲醚对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响 认领 引用 被引量:4
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作者 潘亭 刘媛 吕志平 《广东医学》 CAS 2018年第12期1772-1775,共4页
目的初步探讨大黄素甲醚对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法采用溶剂系统分离法从虎杖中制备出单体大黄素甲醚(Physcion);Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测大黄素甲醚对HSC-T6细胞存活率的影响;通过Ed U染色法进一步观察不同浓... 目的初步探讨大黄素甲醚对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法采用溶剂系统分离法从虎杖中制备出单体大黄素甲醚(Physcion);Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测大黄素甲醚对HSC-T6细胞存活率的影响;通过Ed U染色法进一步观察不同浓度(5、10、20μmol/L)大黄素甲醚作用后,HSC-T6细胞的增殖状况;免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达变化。结果与对照组(加入等量的不含药物的培养基)相比,大黄素甲醚可抑制HSC-T6细胞增殖,且呈浓度依赖性;Ed U染色可观察到大黄素甲醚组阳性细胞数目及所占比例均显著小于对照组(P<0.001);Western blot结果显示大黄素甲醚在10μmol/L和20μmol/L时可降低Bcl-2表达水平(P<0.001),同时升高Bax水平(P<0.001)。结论大黄素甲醚可抑制HSC-T6细胞增殖,可能是通过调节Bax/Bcl-2水平来发挥其作用。 展开更多
关键词 虎杖 肝纤维化 大黄素甲醚 HSC-T6细胞 细胞凋亡
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内质网应激对大鼠肝星状细胞HSC-T6活化的影响 认领 引用 被引量:2
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作者 史晓燕 范妤 +3 位作者 段丽芳 闫曙光 李京涛 席奇 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第8期1054-1059,共6页
目的探索内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)作用对肝星状细胞活化的影响及可能机制。方法利用衣霉素(tunicamycin,Tun)对正常培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6进行处理,处理浓度分别为0(空白对照组),0.1,0.5,1.0,2.0,4.0μg/ml... 目的探索内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)作用对肝星状细胞活化的影响及可能机制。方法利用衣霉素(tunicamycin,Tun)对正常培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6进行处理,处理浓度分别为0(空白对照组),0.1,0.5,1.0,2.0,4.0μg/ml。处理24 h,收集细胞,提取RNA和蛋白质,分别利用real-time PCR和Western blot检测内质网应激相关基因分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、CCAAT增强子结合同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding homologous protein,CHOP),肝纤维化相关基因α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠalpha 1,Col1A1),及TGF-β/Smad通路相关基因TGF-β1、Smad4在RNA转录或蛋白表达水平的变化。结果real-time PCR检测结果表明,与空白对照组相比,Tun处理能够显著上调内质网应激相关基因Grp78、CHOP的转录水平(P<0.01);肝纤维化相关基因α-SMA、TIMP1的转录水平在Tun浓度为2.0μg/ml最高,但Col1A1的转录水平在Tun处理后有所下降(P<0.01或P<0.05);TGF-β/Smad通路相关基因TGF-β1在Tun浓度为2.0μg/ml和4.0μg/ml显著上升(P<0.01或P<0.05)。Western blot检测表明,Tun处理后,与空白对照相比内质网应激相关基因Grp78、CHOP的蛋白水平显著升高(P<0.01或P<0.05);α-SMA的蛋白水平在Tun浓度为1.0μg/ml和2.0μg/ml时明显上调(P<0.01或P<0.05);TGF-β1/Smad通路相关基因Smad4在Tun处理后亦明显上调(P<0.01或P<0.05)。结论内质网应激可促进肝星状细胞的活化,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路相关。 展开更多
关键词 内质网应激 肝星状细胞 HSC-T6 衣霉素
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四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织和HSC-T6细胞NOX4基因及其蛋白表达的变化 认领 引用 被引量:4
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作者 彭婕 李弼民 雷宇鹏 《实用肝脏病杂志》 CAS 2021年第3期319-322,共4页
目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化小鼠和肝星状细胞(HSC-T6)还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶家族氧化酶4(NOX4)基因及其蛋白表达的变化。方法采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)构建10只小鼠肝纤维化模型,采用qRT-PCR法和... 目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化小鼠和肝星状细胞(HSC-T6)还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶家族氧化酶4(NOX4)基因及其蛋白表达的变化。方法采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)构建10只小鼠肝纤维化模型,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测小鼠肝组织NOX4基因和蛋白表达水平。将肝星状细胞(HSC-T6)分为对照组、无意干预组和NOX4-siRNA干预组,后两组分别采用脂质体2000将无意义序列或NOX4-siRNA转染HSC-T6细胞,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测HSC-T6细胞NOX4、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col1a I)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、金属蛋白酶2(MMP-2)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2和Smad3水平,采用DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧(ROS)含量,采用MTT法检测细胞增殖,使用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果模型小鼠肝组织出现明显的病理学损伤,有大量的胶原纤维沉积;模型组小鼠肝组织NOX4 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组细胞比,NOX4-siRNA干预组细胞NOX4 mRNA及其蛋白、ROS、增殖活性、S期细胞比例、α-SMA、Col1a I、TIMP-1、MMP-2、TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3表达水平显著降低,而G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论肝纤维化组织NOX4呈高水平,下调NOX4可抑制肝星状细胞的增殖和活化,并促进其凋亡,可能是通过下调TGF-β/Smad信号通路实现的。 展开更多
关键词 肝纤维化 HSC-T6细胞 还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶家族氧化酶4 GF-β/Smad信号通路 小鼠
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4-羟基苯并恶唑-2-酮对HSC-T6细胞增殖的影响 认领 引用 被引量:5
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作者 林军 樊惠 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2371-2372,共2页
目的研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC-T6细胞增殖的影响。方法 HSC-T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h。应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置... 目的研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC-T6细胞增殖的影响。方法 HSC-T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h。应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置显微镜下观察对照组和药物处理组HSC-T6细胞的形态学变化。结果药物处理组HSC-T6细胞的增殖率均低于对照组,浓度为0.008 mg/ml的药物处理组与对照组相比无显著性差别(P>0.05);其他药物处理组分别与对照组比较能显著地抑制细胞增值(P<0.05或P<0.01)。HBOA对HSC细胞的增殖抑制率均随着药物作用浓度的升高而逐渐升高;经吖啶橙染色后,在荧光倒置显微镜下观察,均可见细胞数量减少、体积缩小、核破裂、核浓缩等变化,且随着作用浓度的增加变化更加明显。结论 HBOA对HSC-T6细胞具有抑制增殖的功效。 展开更多
关键词 4-羟基苯并恶唑-2-酮 HSC-T6细胞 吖啶橙
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