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miR-21-5p抑制SIRT2/AKT轴促进骨关节炎进展机制 认领 引用
1
作者 陈笑天 丁振飞 +4 位作者 宋宜宁 蒋邦红 张帆 高艺 官建中 《昆明医科大学学报》 CAS 2026年第4期30-39,共10页
目的探索miR-21-5p通过调控SIRT2/AKT信号轴在骨关节炎(osteoarthritis,OA)进展中的作用机制。方法采用10 ng/mL IL-1β诱导人软骨细胞系CP-H107构建OA体外模型。实验分组包括:IL-1β+阴性对照模拟物(NC mimic)组、IL-1β+miR-21-5p模拟... 目的探索miR-21-5p通过调控SIRT2/AKT信号轴在骨关节炎(osteoarthritis,OA)进展中的作用机制。方法采用10 ng/mL IL-1β诱导人软骨细胞系CP-H107构建OA体外模型。实验分组包括:IL-1β+阴性对照模拟物(NC mimic)组、IL-1β+miR-21-5p模拟物(mimic)组、IL-1β+阴性对照抑制物(NC inhibitor)组、IL-1β+miR-21-5p抑制物(inhibitor)组及IL-1β+miR-21-5p mimic+oe SIRT2组。通过RT-qPCR、Western blot(WB)、免疫荧光检测MMP13、SIRT2、AKT及p-AKT表达水平,Annexin V-FITC/PI流式细胞术分析细胞凋亡,ELISA检测IL-6、TNF-α、IL-10水平。双荧光素酶报告实验验证miR-21-5p与SIRT2的靶向结合。结果IL-1β刺激后,CP-H107细胞中miR-21-5p及MMP13表达显著升高(P<0.05)。miR-21-5p过表达可促进MMP13表达、细胞因子(IL-6、TNF-α、IL-10)分泌及细胞凋亡(P<0.05),而抑制miR-21-5p可产生相反效果(P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-21-5p可直接靶向SIRT2。miR-21-5p过表达显著下调SIRT2及p-AKT/AKT比值(P<0.05)。进一步实验显示,SIRT2过表达可部分逆转miR-21-5p过表达所致的MMP13上调、炎症因子释放及凋亡增加(P<0.05)。结论miR-21-5p通过靶向抑制SIRT2,阻断其对AKT通路的调控作用,促进软骨细胞分解代谢、炎症反应及凋亡,加速OA进展。 展开更多
关键词 miR-21-5p SIRT2 蛋白激酶B 骨关节炎
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乳腺癌中MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白表达与临床病理特征的相关性及对术后复发的预测价值 认领 引用
2
作者 王亚芹 张军辉 朱胜 《诊断病理学杂志》 2026年第3期401-408,共8页
目的探究乳腺癌中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组蛋白去乙酰化酶2(SIRT2)和细胞性骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)蛋白表达与临床病理特征的相关性及对术后复发的预测价值。方法纳入2021年6月至2023年6月收治的100例乳腺癌患者,均行乳腺癌根... 目的探究乳腺癌中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组蛋白去乙酰化酶2(SIRT2)和细胞性骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)蛋白表达与临床病理特征的相关性及对术后复发的预测价值。方法纳入2021年6月至2023年6月收治的100例乳腺癌患者,均行乳腺癌根治术。手术收集样本,并应用免疫组织化学法检测患者癌组织与癌旁组织中MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白表达,并分别分析癌组织MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白表达与临床病理特征的相关性。根据随访2年1个月结果,统计患者术后复发率,应用KM曲线分析癌组织MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白表达与患者术后复发的关系,并应用ROC曲线分析其对术后复发的预测价值。结果100例乳腺癌患者中,MMP-2蛋白在癌组织中阳性表达52例,癌旁组织中阳性表达9例;SIRT2蛋白在癌组织中阳性表达31例,癌旁组织中阳性表达2例;c-Myc蛋白在癌组织中阳性表达44例,癌旁组织中阳性表达5例。癌组织MMP-2蛋白阳性表达患者组织学分级、TNM分期、淋巴结转移率均显著高于阴性表达患者(P<0.05),两组分子分型差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织SIRT2蛋白阳性表达患者组织学分级、淋巴结转移率均显著高于阴性表达患者(P<0.05),两组分子分型差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织c-Myc蛋白阳性表达患者组织学分级均显著高于阴性表达患者(P<0.05)。癌组织MMP-2阳性无进展生存期显著低于阴性无进展生存期(Log Rankχ2=5.959,P=0.015);癌组织SIRT2阳性无进展生存期显著低于阴性无进展生存期(Log Rankχ2=4.852,P=0.028);癌组织c-Myc阳性无进展生存期显著低于阴性无进展生存期(Log Rankχ2=5.942,P=0.015)。癌组织MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白阳性表达预测患者复发AUC为0.671、0.648、0.638。结论乳腺癌患者癌组织中MMP-2、SIRT2和c-Myc蛋白存在上调表达情况,且与临床病理相关,并对患者术后复发具有一定预测价值,有望成为乳腺癌潜在预测标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 MMP-2 SIRT2 c-Myc 临床病理特征 术后复发
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南葶苈子对慢性心力衰竭大鼠心功能及SIRT2/NF-κB通路的影响 认领 引用 被引量：4
3
作者 李超 陈云 +2 位作者 李梅 盛晓生 余晗俏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2025年第5期1741-1745,共5页
目的 探究南葶苈子提取液对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、南葶苈子组(10 g/kg)、AGK2组(SIRT2抑制剂,82 mg/kg)和南葶苈子(10 g/kg)+AGK2(82 mg/kg)组。采用腹主动脉缩窄法建立CHF... 目的 探究南葶苈子提取液对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、南葶苈子组(10 g/kg)、AGK2组(SIRT2抑制剂,82 mg/kg)和南葶苈子(10 g/kg)+AGK2(82 mg/kg)组。采用腹主动脉缩窄法建立CHF大鼠模型,给药8周后,超声心动图检测大鼠心功能,HE和Masson染色观察心肌组织形态学变化,ELISA法检测血清心肌损伤标志物以及炎症和氧化应激指标,Western blot和RT-qPCR法检测心肌组织SIRT2、NF-κB p65蛋白和mRNA表达。结果 与模型组比较,南葶苈子组大鼠心功能改善;心肌纤维化程度降低(P<0.01);血清cTnI、CK、BNP水平降低(P<0.01);血清和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性升高(P<0.01);心肌组织SIRT2 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),NF-κB p65 mRNA和p-NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01)。SIRT2抑制剂AGK2预处理在一定程度上抵消了南葶苈子提取液对CHF大鼠的保护作用。结论 南葶苈子提取液可通过调控SIRT2/NF-κB通路改善CHF大鼠的心功能,抑制心肌纤维化,减轻心肌氧化应激和炎症。 展开更多
关键词 南葶苈子提取液 慢性心力衰竭 SIRT2/NF-κB通路 炎症反应 氧化应激
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肉苁蓉苯乙醇苷通过SIRT2-C/EBPβ-AREG轴调节成骨分化治疗骨质疏松症 认领 引用 被引量：2
4
作者 章跃 叶里子 +3 位作者 罗雷茗 王远辉 王治 李忠 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2025年第11期1011-1016,1022,共6页
目的基于SIRT2-C/EBPβ-AREG轴探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)通过调控成骨分化改善骨质疏松的作用机制。方法采用卵巢切除法建立小鼠骨质疏松模型。分别采用micro-CT、钙黄绿素双标记和苏木素-伊红染色评估骨小梁数量/厚度、骨形成率和组... 目的基于SIRT2-C/EBPβ-AREG轴探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)通过调控成骨分化改善骨质疏松的作用机制。方法采用卵巢切除法建立小鼠骨质疏松模型。分别采用micro-CT、钙黄绿素双标记和苏木素-伊红染色评估骨小梁数量/厚度、骨形成率和组织形态。采用Western blotting、免疫共沉淀检测SIRT2-C/EBPβ-AREG轴相关蛋白SIRT2、C/EBPβ、AREG表达。采用实时定量PCR检测成骨分化标志基因OCN、OPN、RUNX2、C/EBPβ、AREG mRNA表达。结果CPhGs干预显著改善卵巢切除小鼠骨小梁微结构并促进骨形成,其机制涉及激活SIRT2介导的C/EBPβ去乙酰化,进而上调AREG表达。细胞实验证实,CPhGs通过增强SIRT2与C/EBPβ的相互作用,显著提高MC3T3-E1细胞中碱性磷酸酶活性及OCN、OPN、RUNX2等成骨基因表达,且该效应可被SIRT2敲低逆转。结论CPhGs通过SIRT2-C/EBPβ-AREG轴调控成骨分化进程,为中药活性成分治疗骨质疏松症提供了新的分子靶点和理论依据。 展开更多
关键词 肉苁蓉苯乙醇苷 SIRT2-C/EBPβ-AREG轴 成骨分化 骨质疏松症
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SIRT2对AngⅡ诱导的小鼠心肌成纤维细胞增殖与迁移影响的研究 认领 引用 被引量：1
5
作者 林丽婵 刘芷言 +6 位作者 刘震宇 刘鹏 毛遂 张云森 胡宪文 李锐 陶辉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2025年第4期589-595,603,共7页
目的探讨去乙酰化酶2(SIRT2)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与迁移的作用。方法对1~2 d内的C57BL/6乳鼠心脏进行无菌摘取,碎化为组织匀浆、消化、过滤后提取分离的CFs。CFs贴壁生长至70%~80%汇合度后,加入An... 目的探讨去乙酰化酶2(SIRT2)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与迁移的作用。方法对1~2 d内的C57BL/6乳鼠心脏进行无菌摘取,碎化为组织匀浆、消化、过滤后提取分离的CFs。CFs贴壁生长至70%~80%汇合度后,加入AngⅡ诱导构建体外CFs活化增殖模型,AngⅡ刺激24 h后分别向各组CFs转染空载质粒及SIRT2过表达质粒,后继续培养1~2 d。应用RT-qPCR方法检测SIRT2、增殖细胞核抗原(PCNA)、骨膜素(POSTN)和Ⅰ型胶原A1(Col1A1)的mRNA相对表达量;Western blot方法探测SIRT2、PCNA、POSTN和Col1A1的蛋白相对表达量;CCK-8法与EdU法探测CFs增殖活力;Transwell实验检测CFs迁移能力。结果与CFs空白对照组相比,AngⅡ导致CFs的SIRT2表达量减少与细胞外基质蛋白表达增多,同时CFs的活化增殖明显增高。使用质粒过表达SIRT2上调AngⅡ诱导环境下CFs SIRT2表达后,与空载组相比,过表达组SIRT2表达上调,胶原纤维蛋白表达量降低,同时CFs的增殖与活化明显减少。结论过表达SIRT2能抑制AngⅡ诱导的胶原纤维沉积与CFs活化增殖,SIRT2通过调节AngⅡ诱导环境下CFs活化与增殖,也为心肌纤维化的干预与治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 SIRT2 心肌成纤维细胞 AngⅡ 增殖 迁移 心肌纤维化
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SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激的影响 认领 引用
6
作者 赵天睿 薛琳琳 +3 位作者 聂君书 张怀秀 李辰辰 郭景茹 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2025年第7期1469-1477,共9页
为了探明SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的影响,选取5周龄雄性C57BL/6型小鼠和SIRT2敲除型小鼠各10只,随机分为野生型室温对照组(WT Control)、野生型冷处理组(WT Cold)、SIRT2敲... 为了探明SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的影响,选取5周龄雄性C57BL/6型小鼠和SIRT2敲除型小鼠各10只,随机分为野生型室温对照组(WT Control)、野生型冷处理组(WT Cold)、SIRT2敲除+室温对照组(KO Control)和SIRT2敲除+冷处理组(KO Cold)。室温对照组小鼠在温度为(24±2)℃的环境中饲养,冷处理组置于(4±2)℃人工气候室中每天随机刺激3 h,连续刺激3周。采用H&E、Masson染色以及透射电镜观察小鼠肝脏组织显微及超微结构;通过生化分析仪检测小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)浓度;利用Western blot试验对肝脏组织中紧密连接相关(Claudin1、Occludin)、ERS相关蛋白(GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α、eIF2α)和促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的表达量进行检测。结果显示,与WT Control组相比,WT Cold组与KO Control组小鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,胞质松散,出现白色空泡,少量胶原沉积和纤维增生,肝脏细胞中线粒体轻度肿胀,内质网(endoplasmic reticulum, ER)分布不均,血清中AST及ALT的浓度升高(P<0.050、P<0.010),肝脏组织中Occludin、Claudin1的表达量降低(P<0.050、P<0.010、P<0.001),GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α/eIF2α、TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表达量升高(P<0.050、P<0.010、P<0.001);与KO Control组相比,KO Cold组小鼠肝脏组织出现大量白色空泡、少量气球样变、炎性细胞浸润以及明显的胶原沉积和纤维增生,肝脏细胞中线粒体肿胀,线粒体嵴减少,ER增粗,血清中AST及ALT浓度升高(P<0.010),肝脏组织中Occludin、Claudin1的蛋白表达量降低(P<0.010),GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α/eIF2α、TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表达量升高(P<0.050、P<0.010、P<0.001)。结果表明,SIRT2敲除会加重冷处理所导致的小鼠肝脏组织紧密连接受损,诱导ERS,并进一步促进炎症反应的发生。 展开更多
关键词 SIRT2 肝脏 冷处理 紧密连接 内质网应激 小鼠
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SIRT2参与的生物学通路及其在常见神经退行性疾病研究中的进展 认领 引用
7
作者 任自敬 周佩洋 《湖北医药学院学报》 CAS 2025年第2期230-235,共6页
SIRT2是一种仅依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+)的去乙酰化酶,能够从底物蛋白的赖氨酸残基上移除酰基。在哺乳动物中,Sirtuin蛋白家族涵盖了7个成员(即SIRT1~7),分别拥有不同的酶活性和调控机制,但仅... SIRT2是一种仅依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+)的去乙酰化酶,能够从底物蛋白的赖氨酸残基上移除酰基。在哺乳动物中,Sirtuin蛋白家族涵盖了7个成员(即SIRT1~7),分别拥有不同的酶活性和调控机制,但仅SIRT1、SIRT2、SIRT3及SIRT5具备去乙酰化的功能,并在亚细胞定位上存在差异。SIRT2主要分布于细胞质,但在特定情况下有能力穿越至细胞核。 展开更多
关键词 SIRT2 去乙酰化 神经退行性疾病
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乳腺癌中SIRT2和c-Myc蛋白表达与临床病理特征的关系 认领 引用 被引量：1
8
作者 田世维 梅思思 +7 位作者 杨宇石 段彦林 金柔 周增贵 秦田 杨冰清 尹明英 徐澍 《贵州医科大学学报》 CAS 2025年第6期924-930,共7页
目的探讨乳腺癌中SIRT2和c-Myc蛋白表达之间的相互关系及与临床病理特征的关系。方法385例乳腺癌患者作为乳腺癌组,36例乳腺纤维腺病患者作为对照组,采用免疫组化EnVision二步法检测两组患者乳腺病变组织中SIRT2和c-Myc蛋白的表达,收集... 目的探讨乳腺癌中SIRT2和c-Myc蛋白表达之间的相互关系及与临床病理特征的关系。方法385例乳腺癌患者作为乳腺癌组,36例乳腺纤维腺病患者作为对照组,采用免疫组化EnVision二步法检测两组患者乳腺病变组织中SIRT2和c-Myc蛋白的表达,收集乳腺癌组患者相关临床病理特征资料(年龄、肿瘤大小、组织学分级、分子分型、TNM分期、淋巴结转移、复发与远处转移及死亡情况),分析SIRT2和c-Myc蛋白在乳腺癌组中的表达及与临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组中SIRT2和c-Myc阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);乳腺癌组患者SIRT2与c-Myc蛋白呈正相关(r=0.155,P<0.001)。结论乳腺癌组织中SIRT2和c-Myc蛋白表达上调,且与乳腺癌(组织学分级、分子分型、TNM分期等)临床病理特征正相关;SIRT2和c-Myc蛋白可能成为乳腺癌潜在预测标志物和治疗的靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 SIRT2蛋白 c-Myc蛋白 代谢重编程
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地黄饮子通过SIRT2调节突触可塑性改善学习记忆障碍小鼠认知功能的作用 认领 引用 被引量：6
9
作者 王文婷 郝阳晶 +4 位作者 苏文娜 李钦青 楚世峰 张俊龙 贺文彬 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2025年第6期9-17,共9页
目的:研究地黄饮子对东莨菪碱(SCOP)致学习记忆障碍小鼠认知功能的影响并探索其作用机制。方法:采用腹腔注射SCOP诱导学习记忆障碍小鼠模型。将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(0.9%NaCl,n=10),模型组(SCOP 1 mg·kg-1·... 目的:研究地黄饮子对东莨菪碱(SCOP)致学习记忆障碍小鼠认知功能的影响并探索其作用机制。方法:采用腹腔注射SCOP诱导学习记忆障碍小鼠模型。将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(0.9%NaCl,n=10),模型组(SCOP 1 mg·kg-1·d-1,n=10),地黄饮子低、中、高剂量组(SCOP 1 mg·kg-1·d-1+地黄饮子5.5、11.0、22.0 g·kg-1·d-1,n=10)和多奈哌齐组(SCOP 1 mg·kg-1·d-1+多奈哌齐0.84 mg·kg-1·d-1,n=10),对应药物连续干预6周,第4周开始造模,除正常组外,其余各组小鼠于每日灌胃40 min后腹腔注射SCOP造模,第5周开始行为学测试,于每日造模30 min后开始。采用Morris水迷宫、新物体识别实验评估学习记忆障碍小鼠空间学习记忆功能,尼氏染色观察海马CA1区神经元细胞存活数及尼氏小体,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马沉默信息调节因子2(SIRT2)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体1(GluA1)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化(p)-CREB、突触后致密物95(PSD95)、生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触素(SYN)的蛋白表达,免疫荧光法检测海马DG区双皮质素(DCX)的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),海马CA1区神经元损伤明显,神经元存活数显著减少(P<0.01),海马DG区DCX蛋白表达显著降低(P<0.01),海马组织GluA1、PKA、p-CREB/CREB、PSD95、SYN、GAP-43蛋白水平明显降低(P<0.05,P<0.01)、SIRT2蛋白水平显著增加(P<0.01);与模型组比较,地黄饮子中、高剂量组和多奈哌齐组学习记忆能力明显改善(P<0.05,P<0.01),地黄饮子低、中、高剂量组和多奈哌齐组神经元存活数显著增加(P<0.01),地黄饮子中剂量组和多奈哌齐组DCX蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01),地黄饮子中、高剂量组和多奈哌齐组GluA1、PKA、p-CREB/CREB、PSD95、SYN、GAP-43蛋白水平明显上调(P<0.05,P<0.01),SIRT2蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论:地黄饮子可改善SCOP诱导的学习记忆障碍小鼠的认知功能,其作用机制可能与抑制SIRT2的上调,激活PKA/CREB信号通路,改善突触可塑性,减轻海马神经元损伤有关。 展开更多
关键词 地黄饮子 学习记忆障碍 蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路 沉默信息调节因子2 突触可塑性
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Knockout of Sirt2 alleviates traumatic brain injury in mice 认领 引用 被引量：11
10
作者 Wei Wang Qiu-Yuan Gong +5 位作者 Lin Cai Yao Jing Dian-Xu Yang Fang Yuan Hao Chen Heng-Li Tian 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期350-356,共7页
Sirtuin 2(SIRT2)inhibition or Sirt2 knocko ut in animal models protects against the development of neurodegenerative diseases and cerebral ischemia.However,the role of SIRT2 in traumatic brain injury(TBI)remains uncle... Sirtuin 2(SIRT2)inhibition or Sirt2 knocko ut in animal models protects against the development of neurodegenerative diseases and cerebral ischemia.However,the role of SIRT2 in traumatic brain injury(TBI)remains unclear.In this study,we found that knockout of Sirt2 in a mouse model of TBI reduced brain edema,attenuated dis ruption of the blood-brain barrie r,decreased expression of the nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3)inflammasome,reduced the activity of the effector caspase-1,reduced neuroinflammation and neuronal pyroptosis,and improved neurological function.Knoc kout of Sirt2 in a mechanical stretch injury cell model in vitro also decreased expression of the NLRP3 inflammasome and pyroptosis.Our findings suggest that knockout of Sirt2 is neuro protective against TBI;therefore.Sirt2 could be a novel to rget for TBI treatment. 展开更多
关键词 blood-brain barrier caspase-1 cerebral edema neuroinflammation neuroprotection NLRP3 pyroptosis Sirt2 tightjunction protein traumatic brain injury
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SIRT2沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响 认领 引用 被引量：8
11
作者 宋春丽 任吉华 +2 位作者 冉龙宽 李宛蔚 陈娟 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2013年第24期2634-2638,共5页
目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉... 目的探讨慢病毒介导的沉默信息调节因子2(silent information regulator2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法 Western blot分析SIRT2在多个肝癌细胞系和永生化肝细胞中的表达,通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT2的表达,并通过Real-time PCR和Western blot验证SIRT2基因的沉默效果。细胞迁移及侵袭实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blot检测上皮细胞间充质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)指标蛋白(E-cadherin、α-catenin、α-SMA、N-cadherin)的表达。结果 SIRT2在多个肝癌细胞系中蛋白表达水平明显上调;慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT2的表达水平(P<0.05)。SIRT2基因沉默能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),并使上皮属性蛋白E-cadherin、α-catenin表达水平升高,使间质属性蛋白α-SMA、N-cadherin表达水平降低。结论 SIRT2基因沉默可以通过抑制肝癌细胞上皮细胞间充质转化从而抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 SIRT2 肝癌 迁移 侵袭
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SIRT1和SIRT2基因多态性及合并基因型与秦川牛肉用性状的关联分析 认领 引用 被引量：11
12
作者 桂林生 昝林森 +1 位作者 王洪宝 王洪程 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1741-1749,共9页
旨在探讨SIRT1和SIRT2基因的多态性与秦川牛肉用性状的关系,寻找与秦川牛肉用性状相关的分子标记。本研究利用DNA测序和PCR-PFLP方法检测秦川牛SIRT1和SIRT2基因的多态位点并对其进行基因分型,同时分析了单个多态位点不同基因型及合并... 旨在探讨SIRT1和SIRT2基因的多态性与秦川牛肉用性状的关系,寻找与秦川牛肉用性状相关的分子标记。本研究利用DNA测序和PCR-PFLP方法检测秦川牛SIRT1和SIRT2基因的多态位点并对其进行基因分型,同时分析了单个多态位点不同基因型及合并基因型与秦川牛肉用性状的关联性。结果发现,在SIRT1基因3′侧翼区检测到两个多态位点(G25764A和A25846G),同样在SIRT2基因3′侧翼区也检测到两个突变位点(C19501T和C19518T)。关联性分析表明,在本试验所选取的505头秦川牛样本中,G25764A位点上AA基因型个体的眼肌面积极显著高于AB基因型(P<0.01);A25846G位点上AA基因型个体的眼肌面积与AB和BB两组基因型分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01);C19501T位点的不同基因型对眼肌面积和肌间脂肪影响显著(P<0.05),优良基因型为AA;C19518T的BB基因型个体背膘厚显著高于AA基因型(P<0.05)。通过合并基因型发现,AB-BB-AA-BB的各个肉用性状表现最优(P<0.01或P<0.05)。以上结果提示,SIRT1和SIRT2基因单核苷酸多态性及合并基因型对秦川牛肉用性状有一定的影响,可以作为进行秦川牛肉用性状分子标记辅助选择的候选基因。 展开更多
关键词 秦川牛 SIRT1 SIRT2 肉用性状 合并基因型
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过表达Sirt2抑制猪前体脂肪细胞的分化 认领 引用 被引量：7
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作者 刘炳婷 白亮 +2 位作者 刘飞 李玉成 杨公社 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS 北大核心 2010年第6期575-580,共6页
本文旨在利用过表达技术研究Sirt2在猪前体脂肪细胞分化中的作用.首先将Sirt2插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,并与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,重组体用Lipofectamine2000包装转染HEK293细胞系,成功获得重组腺病毒vAd... 本文旨在利用过表达技术研究Sirt2在猪前体脂肪细胞分化中的作用.首先将Sirt2插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,并与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,重组体用Lipofectamine2000包装转染HEK293细胞系,成功获得重组腺病毒vAd-Sirt2.用vAd-Sirt2感染猪前体脂肪细胞,48h后油红O染色法观察脂肪细胞分化情况,RT-PCR检测脂肪细胞分化标志基因PPARγ和aP2的表达.结果显示,过表达Sirt2促使细胞中脂滴减少,同时标志基因PPARγ、aP2mRNA水平显著降低,说明Sirt2抑制猪前体脂肪细胞分化,这为控制猪体脂沉积提供依据以及为人类肥胖和相关疾病的治疗和预防奠定基础. 展开更多
关键词 Sirt2 前体脂肪细胞 分化 猪
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SIRT2在肝癌发生发展中的作用 认领 引用 被引量：7
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作者 韩可琪 阮昕 贺明 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1247-1251,共5页
沉默信息调节因子(silence information regulator,sirtuin)是一类高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)依赖的组蛋白去乙酰化酶,在衰老、代谢、细胞凋亡、基因转录、炎症发生等过程中发挥重要作用。哺乳动物有7种sirtuin,即SIRT1~SI... 沉默信息调节因子(silence information regulator,sirtuin)是一类高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)依赖的组蛋白去乙酰化酶,在衰老、代谢、细胞凋亡、基因转录、炎症发生等过程中发挥重要作用。哺乳动物有7种sirtuin,即SIRT1~SIRT7。其中SIRT2的异常表达与包括肝癌在内的多种癌症相关:SIRT2既可以发挥癌基因的作用,也可以发挥抑癌基因的作用。而SIRT2如何通过对不同底物去乙酰化发挥不同的作用仍然存在争议。该文主要对SIRT2在肝癌发生发展中的作用进行综述。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子 SIRT2 有丝分裂 β连环蛋白 肝癌 线粒体代谢
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sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用 认领 引用 被引量：4
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作者 马珊珊 崔渊博 +5 位作者 姚宁 邢衢 韩康 宋及时 张彦婷 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第1期10-14,共5页
目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;... 目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均<0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。 展开更多
关键词 sirt2 腺病毒 人脐带间充质干细胞 衰老
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SIRT2基因沉默后对肝癌细胞增殖的影响 认领 引用 被引量：5
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作者 冉龙宽 宋春丽 +4 位作者 李宛蔚 任吉华 陈祥 陶娜娜 陈娟 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2014年第20期2098-2102,共5页
目的探讨沉默信息调节因子2相关酶2(silent information regulator 2 related enzyme 2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制。方法利用慢病毒介导的shRNA干扰技术,靶向沉默SIRT2基因的表达;Western blot检测SIRT2基因沉默效... 目的探讨沉默信息调节因子2相关酶2(silent information regulator 2 related enzyme 2,SIRT2)基因沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制。方法利用慢病毒介导的shRNA干扰技术,靶向沉默SIRT2基因的表达;Western blot检测SIRT2基因沉默效果及SIRT2沉默后β-catenin蛋白的表达变化;流式细胞计数检测SIRT2基因沉默后肝癌细胞周期的变化,CCK-8法检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响,台盼蓝计数检测SIRT2基因沉默及过表达β-catenin后,SIRT2基因沉默对肝癌细胞增殖的影响;BrdU实验检测SIRT2基因沉默对肝癌细胞DNA合成的影响;平板集落实验检测SIRT2沉默对肝癌细胞克隆形成能力的影响。结果 SIRT2 shRNA靶向沉默显著抑制肝癌细胞SIRT2的表达水平,shRNA沉默组肝癌细胞PLC-5的增殖能力较对照组分别下降48.3%(shSIRT2-1)、55.6%(shSIRT2-2)(P<0.01);SIRT2基因沉默后,肝癌细胞出现G1期阻滞,β-catenin蛋白表达水平下降;过表达β-catenin后SIRT2基因沉默组较对照组肝癌细胞增殖分别升高了89%(shSIRT2-1)、75%(shSIRT2-2)(P<0.01)。结论 SIRT2沉默可能通过调节β-catenin信号通路来影响肝癌细胞增殖。 展开更多
关键词 SIRT2 肝癌 增殖
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Sirt1及Sirt2与活性分子INA的作用机制研究 认领 引用 被引量：2
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作者 陈晓光 赵晓杰 +3 位作者 王嵩 王丽萍 李惟 孙家钟 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第2期199-204,共6页
应用分子模拟理论与方法研究了人类沉默信息调节因子2相关酶类Sirtuin家族成员Sirt1及Sirt2与一种活性分子(命名为INA)的作用机制.同源模建了Sirt1的三维结构,通过分子对接手段得到Sirt1(NAD+)-INA及Sirt2(NAD+)-INA的两种复合物体系,... 应用分子模拟理论与方法研究了人类沉默信息调节因子2相关酶类Sirtuin家族成员Sirt1及Sirt2与一种活性分子(命名为INA)的作用机制.同源模建了Sirt1的三维结构,通过分子对接手段得到Sirt1(NAD+)-INA及Sirt2(NAD+)-INA的两种复合物体系,进行了分子动力学模拟.并且分别计算了两种体系中关键氨基酸残基与INA的结合自由能值,由此推测出Sirt1(NAD+)-INA、Sirt2(NAD+)-INA体系结合位点分别为Val72,Ser73和Arg272及Phe235,Leu264和Gly305,确证了两种体系的结合模式.模拟结果表明,在Sirt1(NAD+)-INA体系中,INA与催化底物NAD+距离较近,可以相互作用,具有较高活性;在Sirt2(NAD+)-INA体系中,INA与催化底物NAD+距离较远,与在Sirt1体系中比较,INA对Sirt2体系的活性较弱,结果与实验一致.本文的研究,对今后以去乙酰化酶Sirt1,Sirt2为靶点的新药开发具有一定指导意义. 展开更多
关键词 分子模拟 Sirt1 Sirt2 活性分子INA 作用机制
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丙泊酚通过影响SIRT2调控线粒体自噬对酒精性肝损伤的保护作用 认领 引用 被引量：4
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作者 宣文婷 卢昕奕 李俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1512-1518,共7页
目的探讨丙泊酚(propofol,Prop)抑制小鼠酒精性肝损伤机制。方法HE和油红染色检测肝脏损伤情况和脂质的堆积情况;LC3(light chain 3)和TOM20(mitochondrial 20 ku outer membrane protein)免疫荧光共定位染色检测线粒体自噬水平;丙氨酸... 目的探讨丙泊酚(propofol,Prop)抑制小鼠酒精性肝损伤机制。方法HE和油红染色检测肝脏损伤情况和脂质的堆积情况;LC3(light chain 3)和TOM20(mitochondrial 20 ku outer membrane protein)免疫荧光共定位染色检测线粒体自噬水平;丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平反映肝细胞受损程度;分子对接预测与Prop相作用的蛋白;Western blot和免疫组化检测哺乳动物信号调节子2(silent information regulator 2,SIRT2)蛋白表达情况。结果相较于酒精损伤组,Prop组血清ALT、AST水平明显降低,小鼠肝组织脂肪化明显减少,线粒体自噬增强。通过分子对接实验与Western blot,发现Prop与SIRT2蛋白有高度相关性,且Prop能明显逆转酒精导致的SIRT2蛋白低表达。进一步的实验发现SIRT2抑制剂(SirReal2)能够明显抑制Prop对于肝脏的保护作用。结论Prop通过提高SIRT2蛋白水平增强线粒体自噬,从而在酒精性肝损伤小鼠中发挥肝脏保护作用。 展开更多
关键词 线粒体自噬 丙泊酚 酒精性肝损伤 SIRT2 肝脏保护 围术期肝脏保护
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干扰Sirt2促进C2C12成肌细胞分化 认领 引用 被引量：4
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作者 吴国芳 路宏朝 +4 位作者 贾龙 宋成创 史新娥 杨公社 孙世铎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期714-720,共7页
Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并... Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子. 展开更多
关键词 Sirt2 成肌分化 C2C12 干扰载体
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湘村黑猪sirt2基因多态性及其与肉质性状的关联分析和组织表达研究 认领 引用 被引量：2
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作者 崔清明 张星 +9 位作者 彭英林 高峰 陈晨 邓缘 任慧波 胡雄贵 朱吉 罗璇 刘莹莹 左剑波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1086-1093,共8页
本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘... 本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘村黑猪sirt2基因多态位点进行分析,采用实时荧光定量PCR技术对sirt2基因在湘村黑猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、后腿肌和背最长肌8个组织中的相对表达量进行分析,利用SAS 9.4软件对sirt2基因突变位点不同基因型与肌肉色值、pH_(45 min)、pH_(24 h)、滴水损失、失水率、肌内脂肪、嫩度和眼肌面积进行关联分析。结果显示,在湘村黑猪sirt2基因第8外显子扩增片段中的240 bp处发现1处C→T碱基突变,编码氨基酸由精氨酸(Arg)变为半胱氨酸(Cys),为错义突变,并形成CC、CT和TT 3种基因型,CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,经χ~2检验表明该突变位点偏离哈代-温伯格平衡;该位点群体纯合度较高,有效等位基因数为1.301,多态信息含量为0.205,为低度多态(PIC0.05),但显著高于心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺和后腿肌(P0.05)。本试验结果表明,sirt2基因对湘村黑猪肉质性状的发育有一定影响,可作为影响湘村黑猪肉质性状的候选基因进行深入研究。 展开更多
关键词 湘村黑猪 sirt2基因 肉质性状 组织表达 关联分析
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