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Cloning,expression and characterization of serine palmitoyltransferase(SPT)-like gene subunit(LCB2) from marine Emiliania huxleyi virus(Coccolithovirus) 认领 引用 被引量：4
1
作者 LIU Xuhong ZHENG Tianling +1 位作者 CAI Yiqin LIU Jingwen 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期127-138,共12页
The authors have isolated and characterized a novel serine palmitoyltransferase （SPT）-like gene in marine Emiliania huxleyi virus （EhV-99B1）. The open-reading frame （ORF） of EhV99BI-SPT encoded a protein of 496 ... The authors have isolated and characterized a novel serine palmitoyltransferase （SPT）-like gene in marine Emiliania huxleyi virus （EhV-99B1）. The open-reading frame （ORF） of EhV99BI-SPT encoded a protein of 496 amino acids with a calculated molecular mass of 96 kDa and Ip 6.01. The results of sequence analysis showed that there was about 31% 45% identity in amino acid sequence with other organisms. The maximum likelihood phylogenetic tree suggested that the EhV99B1-SPT gene possibly horizontally transferred from the eukaryote. Hydrophobic profiles of deduced amino acid sequences suggested a hydrophobic, globular and membrane-associated protein with five transmembrane domains （TMDs） motifs. Several potential N-linked glycosylation sites were presented in SPT. These results suggested that EhV99BI-SPT was an integral endoplasmic reticulum membrane protein. Despite lower sequence identity, the secondary and three-dimensional structures predicted showed that the “pocket” structure element composed of 2a-helices and 4β- sheets was the catalytic center of this enzyme, with a typical conserved “TFTKSFG” active site in the N-terminal region and was very close to those of prokaryotic organisms. However, the N-terminal domain of EhV99B1-SPT most closely resembled the LCB2 catalysis subunit and the C-terminal domain most closely resembled the LCBI regulatory subunit of other organisms which together formed a spherical molecule. This “chimera” was highly similar to the prokaryotic homologous SPT. For a functional identification, the EhV99B1-LCB2 subunit gene was expressed in Escherichia coli, which resulted in significant accumulation of new sphingolipid in E. coli cells. 展开更多
关键词 Emiliania huxleyi virus serine palmitoyltransferase （SPT） clone expressiong andcharacterization
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猪A-FABP基因真核表达载体的构建及其组织表达 认领 引用 被引量：6
2
作者 李晓玲 于光辉 +2 位作者 崔小荣 张廷荣 孙金海 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期103-107,共5页
本实验以长白猪背最长肌为实验材料,进行组织RNA的提取及A-FABP基因的克隆,构建p EGFPN1-A-FABP真核表达载体,并通过脂质体转染成纤维细胞,48 h观察荧光表达。同时应用荧光定量PCR法检测猪7种不同组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、... 本实验以长白猪背最长肌为实验材料,进行组织RNA的提取及A-FABP基因的克隆,构建p EGFPN1-A-FABP真核表达载体,并通过脂质体转染成纤维细胞,48 h观察荧光表达。同时应用荧光定量PCR法检测猪7种不同组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、腿肌)中A-FABP基因的差异表达。结果表明:成功构建p EGFP-N1-A-FABP融合表达载体,并在细胞中表达绿色荧光蛋白;A-FABP基因在7种组织中均有表达,其中背最长肌和腿肌中A-FABP基因的表达量最高,与其他组织相比差异极显著(P0.05)。表明该基因能够在真核载体和细胞中表达,并且在猪不同组织的表达具有差异性。 展开更多
关键词 猪 A-FABP基因 真核表达载体 组织表达
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短星翅蝗卵子发生过程中原癌基因c-kit特异性表达 认领 引用 被引量：2
3
作者 赵卓 任炳忠 +1 位作者 郝锡联 袁海滨 《吉林农业大学学报》 CAS 北大核心 2008年第2期138-141,共4页
将免疫组织化学和生物统计分析方法相结合,对吉林省四平地区的短星翅蝗（Calliptamus abbreviatusIkonn.）卵子发生过程中c-kit特异表达特点和动态进行了研究。结果表明：卵子发生过程中,第1-6阶段卵母细胞中有不同程度的c-kit蛋白特异... 将免疫组织化学和生物统计分析方法相结合,对吉林省四平地区的短星翅蝗（Calliptamus abbreviatusIkonn.）卵子发生过程中c-kit特异表达特点和动态进行了研究。结果表明：卵子发生过程中,第1-6阶段卵母细胞中有不同程度的c-kit蛋白特异性表达,但随着卵黄发生该蛋白表达开始逐渐减弱,最后消失;滤泡细胞、输卵管和受精囊的腺细胞中有c-kit蛋白颗粒的存在。 展开更多
关键词 短星翅蝗 卵子发生 c-kit 特异性表达
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试析汉民间乐府叙事诗的叙事艺术 认领 引用
4
作者 杨静 《成都教育学院学报》 2006年第10期84-86,共3页
汉民间乐府叙事诗以其完整的情节和典型的人物形象,成为我国叙事诗成熟的标志,同时由于其现实主义的创作原则、叙中插画的叙事特色,以及感事型叙事模式,彰显了我国叙事诗独特的艺术魅力,在我国文学史上具有极大的价值。
关键词 汉民间乐府叙事诗 情节 人物 现实主义 叙中插画 感事
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